文档介绍：中南民族大学
硕士学位论文
透明质酸-喜树碱及叶酸-透明质酸-喜树碱复合体的合成及表征
姓名:刘祥
申请学位级别:硕士
专业:分析化学
指导教师:孙小梅;李春涯
2011-05-27
中南民族大学硕士学位论文
摘要

喜树碱是从中国珙桐科植物喜树中分离得到的一种生物碱,对消化道肿瘤、
肝癌、膀胱癌以及白血病等具有较好的疗效。然而其毒性较强,水溶性较差,且
易开环失活,限制了其在临床中的应用。本文以具有较好生物相容性和肿瘤靶向
性的透明质酸和叶酸实现喜树碱的改性修饰,展开了以下两方面的工作:
1. 合成 3,3´-二硫代二丙酸,并与喜树碱通过酯化反应生成喜树-20-O-3,3´-二硫代
二丙酸酯;基于酰胺化反应将己二酸二酰肼、透明质酸和喜树碱-20-O-3,3´-二硫
代二丙酸酯连接,形成喜树碱-20-O-3,3´-二硫代二丙酸酯-己二酸二酰肼-透明质酸
纳米微球复合体,并以异硫氰酸荧光素(FITC)作为荧光标记试剂标记该复合体。
采用傅立叶红外光谱(FT-IR)、核磁共振氢谱(H-NMR)以及透射电子显微镜(TEM)
对中间体及目标产物进行了表征;高效液相色谱法测该复合体的载药量为 %;
在 37℃pH 为和 pH 为的磷酸缓冲溶液中 72 小时后约有 %和 %的
喜树碱释放;细胞实验显示该复合体对肝癌细胞及宫颈癌细胞具有良好的选择性,
其对肝癌及宫颈癌的细胞毒性明显高于喜树碱单体。
2. 以乙二胺为连接体,通过与叶酸γ位羧基反应将叶酸接到透明质酸-己二酸二
酰肼-喜树碱-20-O-3,3´-二硫代二丙酸酯复合体上,采用紫外光谱和核磁共振谱进
行表征;采用高效液相色谱法测定其载药量为 %;在 37℃下 pH 为和 pH
为的的缓冲溶液中 72 小时后分别约有 %和 %的喜树碱释放。细胞毒性
实验证明其对肝癌和宫颈癌细胞毒性比透明质酸-己二酸二酰肼-喜树碱-20-O-3,3-́
二硫代二丙酸酯复合体更高。

关键词:喜树碱;透明质酸;叶酸;靶向性;肿瘤细胞.

I
透明质酸-喜树碱及叶酸-透明质酸-喜树碱复合体的合成及表征
Abstract

Camptothecin (CPT) is an alkaloid which originally isolated from the Chinese tree
Camptotheca acuminate. CPT has good curative effect on the treatment of liver cancer,
bladder cancer, leukemia and other malignant tumors. However, its clinical use is
restricted by its water-insolubility, cell toxicity and forming inactivation open-loop
easily. In order to e these problems, hyaluronic acid and folic acid which have
good water-solublity and patiblity was connected to CPT to obtain a conjugate.
The performances of these conjugates on tumor cells as target drugs were investigated.
The work was summarized as following:
1. 3,3´-dithiodipropionic acid was synthesized from 3-thiopropionic acid. Then
camptothecin-20-O-3,3´-dithiodipropanoate was synthesized with camptothecin and
3,3´-dithiodipropionic acid as start materials through esterification. A hyaluronic
acid-dipodihydrazide-camptothecin conjugate in nano-meter size was prepared by
amidation of hyaluronic acid and campt