生物工程下游技术第五章 细胞破碎、蛋白质复性和固液分.ppt

文档介绍：第二篇目标产品的分离与纯化
第五章细胞破碎、蛋白质复性和固液分离
细胞破碎
固液分离
初级分离(粗)
纯化精制
下游技术基本过程
下游加工技术的重要性
。
(抗生素、乙醇、柠檬酸占60%)。
。
几种产品在发酵液中的浓度
产品典型浓度(g/L)
抗生素 25
氨基酸 100
酒精 100
有机酸 100
酶 20
蛋白质 10
下游加工技术的特点
1. 发酵液的复杂性造成分离上的困难性。
2. 欲提取的产物通常浓度低且很不稳定。
3. 多为分批操作,各批发酵液不尽相同,要求下游加工有一定弹性。
产物提纯过程的不同决定于:
对象材料、目标产物特性及对其纯度的要求
第一节概述
基因工程生物制品分离纯化:
工程菌经过大规模培养后,产生的有效成分含量很低,杂质含量却很高
分离纯化极其重要
基因工程药物从转化细胞、生产,对产品的纯度要求高于传统产品。
发酵液
细胞分离
胞内产物
胞外产物
细胞破碎
固液分离
包涵体
细胞碎片分离
变性
复性
浓缩初步分离高度纯化制剂

产品
基因工程制品分离纯化的一般流程
初级分离:分离细胞和培养液,破碎细胞释放产物,溶解包含体(包涵体),复原蛋白质,浓缩产物,去除大部分杂质等过程。主要决定产物的得率。
纯化精制:初级分离基础上,用各种高选择性手段,主要是各种层析技术,将目标产物和干扰杂质尽可能分开,使产物的纯度达到有关要求。主要决定产物的纯度。
产物提纯过程包括两个基本阶段:
第二节细胞破碎
目的:释放细胞内含物。
分类:按照是否存在外加作用力分为机械法和非机械法。
问题:
破碎率是否越高越好?
以大肠杆菌为宿主药物多为胞内产物