文档介绍：EMMPRIN在甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
【摘要】目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix matalloproteinase inducer,EMMPRIN)在甲状腺乳头状癌组织中的表达及临床意义。方法: 收集武汉大学人民医院病理科2004~2009年手术切除及活检的甲状腺乳头状癌标本共40例,另取癌周围组织5例作对照。采用免疫组织化学方法观察各组组织内EMMPRIN的表达。利用HPIAS2000图像分析系统测定EMMPRIN在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:甲状腺癌组织中EMMPRIN呈高表达;癌旁组织中EMMPRIN呈低表达。图像分析结果显示:甲状腺乳头状癌与癌旁组织之间EMMPRIN的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义()。结论:EMMPRIN过表达在甲状腺癌的发生和发展中起了重要作用。
【关键词】甲状腺乳头状癌; EMMPRIN; 免疫组织化学; 统计分析
甲状腺癌是头颈部常见的恶性肿瘤,好发于女性和青少年患者。因其病理类型多,故生物学行为差异较大。通常我们依据组织来源及分化程度把它分成四型:乳头状癌,滤泡状癌,髓样癌及未分化癌。而乳头状癌是甲状腺最常见的恶性肿瘤,约占甲状腺癌的60% ~70%[1,2],其发病机制并不完全清楚,因此,从分子水平进一步阐明甲状腺癌的发生机制对其防治具有一定的意义。
细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix matalloproteinase inducer,EMMPRIN) ,广泛地存在于人类各种肿瘤细胞中,刺激与肿瘤有关的成纤维细胞和肿瘤细胞自身的基质金属蛋白酶类合成增加,进而降解基底膜组成成分和细胞外基质,促进恶性肿瘤的转移[3,4]。
本研究采用免疫组化和图像分析方法检测和分析了乳头状腺癌中EMMPRIN的表达,探讨EMMPRIN在甲状腺癌的发生和发展中的作用机制。
1 材料与方法
材料
材料来源收集武汉大学人民医院存档甲状腺乳头状癌蜡块40例。其中,男12例, 女28例,年龄23~68 岁。甲状腺癌组患者术前均未做放、化疗。
材料分组蜡块切片厚
5μm,帖片于涂有多聚赖氨酸的洁净载玻片上,置于烤箱烤干待用。常规HE染色,用免疫组织化学SP法检测EMMPRIN在各组中的表达,另取5例瘤旁组织为对照组。
主要试剂和仪器
主要试剂
①浓缩型鼠抗人EMMPRIN单克隆抗体(北京中杉生物技术有限公司) ;②超敏即用型SP通用型免疫组织化学试剂盒(北京中杉生物技术有限公司) ;③显色试盒及多聚赖氨酸(北京中杉生物技术有限公司)。
方法
免疫组织化学SP法检测EMMPRIN相关抗原
主要步骤: 5μm组织切片常规脱蜡至水,3%过氧化氢处理10 min以抑制内源性过氧化物酶活性,EMMPRIN采用微波抗原修复(3档,10 min),正常羊血清37℃孵育10 min以减少非特异性反应,一抗37℃孵育1h,生物素标记的二抗,37℃孵育10 min,SP复合物处理10 min ,D