文档介绍：HLAB27对强直性脊柱炎的临床应用
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:郑静陈佳荣李彩玉韩兆东周玉明

【关键词】HLAB27;强直性脊柱炎;流式细胞仪

1材料与方法
、疼痛门诊、中医科门诊、骨科门诊和住院病例。健康体检者20例均为汉族,其中男性14例,女性6例,年龄16~46岁,平均31岁;腰痛患者47例,其中男性27例,女性20例,年龄23~76岁,;临床诊断AS42例,年龄17~79岁,平均48岁。
B27FITC/HLAB7PE单克隆抗体(PNIM1502),免疫阴性对照抗体IgG2aFITC/IgG1PE(PN IM 1255),鞘液,流式细胞仪,以上试剂及仪器均购自美国BeckmenCoulter公司。

:取清晨空腹静脉血2ml,EDTA2K抗凝,室温保存,6h内测定:混匀标本,用可调移液器将10
μl抗体加入不同试管,再加40μl抗凝全血,充分混匀,避光室温孵育15min;溶血后500r/min离心10min,弃上清,每管加入1mlPBS,混匀,待测。
:光源488nm的氩离子激光,FITC受激发后发出绿色荧光,PE发出红色荧光。上机前先用标准微球(FlowCheck)进行光路和流路的校正,使变异系数在2%以内。根据细胞的FCS(前向角散射)和SSC(侧向角散射)特点设置淋巴细胞门,然后分析HLAB27和HLAB7表达,在PMT2/PMT3点图中记数HLAB27+/HLAB7细胞。标本上机后计数5000个淋巴细胞,荧光强度以对数放大,光散射数据存盘。
2结果
B27检测结果HLAB27含量:以HLAB27阳性细胞百分率表示。健康者中HLAB27阳性率分别为1%,腰痛患者中HLA%,AS患者中HLAB27阳性者39例,%。HLAB27和HLAB7均阳性者共检出6例,包括AS患者1例,腰痛患者中3例。
。HLAB27检测的淋巴细胞设门(图1),阴性对照细胞标记抗原为IgG2aFITC/IgG1PE(图2),阴性结果几乎所有淋巴细胞均在阴性区(图3),阳性结果几乎所有淋巴细胞均在阳性区(图4)。
3讨论
有关强直性脊柱炎的发病机制及HLA
B27与强直性脊柱炎的关系,至今仍不十分清楚,目前认为病因为多重因子交互影响。据统计,90%~95%的患者具有HLAB27抗原(即HLAB27阳性)。所有HLAB27(+)的人,只有2%~10%终将发展成强直性脊柱炎;强直性脊柱炎发病与否,与细菌造成的胃肠道或泌尿道感染关系密切;细菌感染,常常使得HLAB27阳性的人发病,或已发病的人恶化;致关节炎抗原学说等[5]。由于HLAB27与强直性脊柱炎之间的强相关性,因此HLAB27检测被列为临床最有价值的诊断强直性脊柱炎工具之一,有助于对强直性脊柱炎的确诊[6]。本实验检测的42例AS患者HLA%,表明HLAB27与A