文档介绍：Id1在乙型肝炎病毒相关性肝脏疾病中的表达
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:刘豫瑞, 林孟新, 曾达武
【摘要】目的探讨DNA结合/分化抑制蛋白1(Id1)在病毒性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化和乙肝病毒感染相关肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法免疫组织化学SP法研究病毒性乙型肝炎40例、乙型肝炎肝硬化30例、HCC 65例及癌旁肝组织40例中Id1的表达情况。结果 Id中表达上调,与分化程度呈正相关(r=,),在无转移肿瘤中及≤5 cm肿瘤中表达上调();Id1在病毒性乙型肝炎、中的表达、表达的差别有统计学意义()。结论 Id1在乙型肝炎病毒性肝脏疾病中的表达上调,的诊断及治疗提供一定的理论依据。
【关键词】抑制因子,免疫; 癌,肝细胞; 肝肿瘤; 肝炎病毒, 乙型; 肝硬化
肝硬化和乙型肝炎病毒是肝细胞癌(HCC)发生的重要危险因素,中80%患者同时患有肝硬化;%[1
2],这表明HBV持续感染的肝脏炎症和肝脏纤维化与肿瘤的形成之间有一定关系。DNA结合/分化抑制蛋白1(inhibitor of differentiation/DNA binding1,Id1)是1990年代发现的一种分化抑制因子,可促进细胞增殖,参与肿瘤的血管形成,促进肿瘤的生长及转移[3],中的作用尚未清楚。笔者选择慢性乙型肝炎、病例,研究Id1在其中的表达情况,并探讨其临床意义。
1 对象与方法
对象收集病毒性乙型肝炎患者40例,男性23例,女性17例,年龄中位数33岁(19~45岁);乙型肝炎肝硬化患者30例,男性21例,女性9例,年龄中位数41岁(18~47岁)。患者65例,男性47例,女性18例,年龄中位数49岁(27~68岁)。均经病理证实,术前检查均为HBV感染,未进行任何化疗、放疗治疗。组织按癌细胞分化程度分级,以有无淋巴结转移和/或门静脉癌栓作为判断肿瘤转移的指标。取距肿瘤3 cm镜下无癌的癌旁组织40例及15例因外伤手术切除的正常肝脏标本作为对照组。
方法标本经10%甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,4 μm连续切片。采用链酶抗生物素蛋白过氧化物酶免疫组织化学(SP)法。柠檬酸抗原修复缓冲液高温高压抗原修复3 min;内源性过氧化物阻断剂(SP Kit9710,福州迈新公司)封闭内源性过氧化物酶活性30 min;Id
1兔抗人多克隆抗体1∶100(Santa Cruz C20, USA)4 ℃孵育过夜;依次加入正常非免疫动物血清、生物素标记的第二抗体及链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶(SP Kit9710),各孵育10 min,DAB显色3 min;苏木素复染1 min。以磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)置换一抗,其余步骤相同作为阴性对照。
结果判断 Id1免疫组织化学染色计分由阳性细胞染色强度和阳性细胞百分比两部分组成,具体为:根据免疫组化阳性细胞染色强度(A),阳性反应为胞膜或胞质内出现棕黄色颗粒状染色,弱强度染色为1分,中等强度染色为2分,高强度染色为3分;阳性细胞百分比(B):11%~50%为2分,50%~80