文档介绍：IL12和IL10与实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠发病的相关性
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:檀国军, 徐玉, 王秀丽, 朱一飞, 刘静, 郭力
【摘要】目的: 探讨IL12及IL10与实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠发病的相关性。方法: 以豚鼠全脊髓匀浆与福氏完全佐剂为抗原免疫Wistar大鼠建立EAE模型。取脑、脊髓组织石腊包埋, 病理切片, 光镜观察; 采用双抗体夹心法ELISA检测Wistar大鼠免疫后7、 14、 21 d不同时间段血清中IL12、 IL10的含量。结果: EAE组免疫后第7天IL12水平即出现明显上调, 早于临床症状的发生, 随免疫后时间的延长, IL12表达呈逐渐增高后缓慢下降的变化趋势, 并且与EAE大鼠病情评分呈明显正相关(r=, )。免疫后第21天EAE组IL10水平与CFA组和NS组比较明显升高()。结论: IL12和IL10分别与EAE的发病和缓解密切相关。
【关键词】脑脊髓炎; 自身免疫性; 实验性; IL12; IL10
多发性硬化(multiple sclerosis, MS)是临床常见的中枢神经系统(central nervous system, CNS)炎性脱髓鞘的自身免疫性疾病。实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomye
litis, EAE)是CD4+S自身免疫性脱髓鞘疾病, 是MS的经典动物模型。目前MS的发病机制尚不清楚, Karpus等[1]认为与Th1/Th2失衡有关。研究表明, Th1与Th2类细胞因子(cytokine, CK)的表达分别与EAE病情进展和缓解相关[2]。本研究通过观察EAE大鼠血清中IL12、 IL10水平变化, 目的在于探讨IL12及IL10与EAE发病的相关性, 以期为深入了解MS的发病机制、探索新的有效治疗途径和病情的监测提供理论依据。
1 材料和方法
材料雌性Wistar大鼠(72只, 6~8周龄, 体质量180~200 g)、清洁级雌性豚鼠(5只, 体质量350~400 g)均购自河北医科大学实验动物中心。卡介苗(60 g/L)为北京生物制品所提供; 完全福氏佐剂购自美国Sigma公司; IL12、 IL10双抗体夹心ELISA试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司。
方法
动物分组法将健康、雌性Wistar大鼠72只, 随机分3组: (1)EAE组, 36只, 诱导后随机分7、 14、 21 d 3个亚组, 每亚组各12只大鼠; (2)plete Freund’s adjuvant, CFA)组: 18只, 以CFA免疫大鼠, 分组同EAE组, 每亚组各6只大鼠; (3)生理盐水(normal saline, NS)对照组: 18只, 仅注射NS, 分组同CFA组。
完全抗原的制备健康350~400 g雌性豚鼠5只用100 g/L水合氯醛350 mg/kg腹腔注射至四肢瘫软, 迅速取其全脊髓。按1 g脊髓
∶1 mL NS在冰槽中用超声细胞粉碎仪制成500 mL/L的豚鼠全脊髓匀浆(gu