文档介绍：MMP2、PTEN在骨肉瘤组织中的表达及临床意义
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【摘要】目的探讨基质金属蛋白酶2 (MMP2)及张力蛋白和辅助蛋白同源、第10号染色体丢失的磷酸酶(PTEN)的表达在骨肉瘤发生、发展中的作用及其相互关系。方法应用免疫组化SP法检测40例骨肉瘤组织、20例骨软骨瘤组织中MMP2、PTEN蛋白的表达情况,并分析两者之间表达的相关性。结果 MMP2在骨肉瘤组织中的阳性率为65%(26/40),而在骨软骨瘤组织中的阳性率为0,差异具有显著性(χ2=,)。PTEN蛋白在骨肉瘤组织中的阳性表达率为55%(22/40),而在骨软骨瘤组织中为90%(18/20),两者相比差异有统计学意义(χ2=,)。在骨肉瘤组织中,MMP2和PTEN表达强度之间呈负相关(r=-,)。结论 MMP2和PTEN与骨肉瘤的发生、发展以及侵袭、转移有关,且两者具有相关性,联合检测MMP2和PTEN的表达将对骨肉瘤的早期诊断、预后判断有一定指导意义。
【关键词】骨肉瘤明胶酶A PTEN 免疫组织化学
骨肉瘤是最常见的骨原发性恶性肿瘤,恶性程度高,预后较差。转移是骨肉瘤病人死亡的主要原因,也是肿瘤治疗中的一大难题。肿瘤细胞在侵袭转移过程中必须破坏由细胞基质及基膜构成的细胞外基质屏障(ECM),而在参与破坏ECM的酶类中基质金属蛋白酶(MMPs)与肿瘤侵袭转移的关系最为密切。基质金属蛋白酶
2(MMP2)属于明胶酶,是一种锌离子依赖蛋白酶,激活的MMP2在肿瘤侵袭转移中发挥着关键性作用。抑癌基因的失活是导致肿瘤发生的原因之一。张力蛋白和辅助蛋白同源、第10号染色体丢失的磷酸酶(PTEN)是1997年被发现的第一个具有酪氨酸磷酸酶活性的抑癌基因。研究显示,PTEN与多种肿瘤如胶质母细胞瘤、乳癌、前列腺癌等有关,但PTEN在骨肉瘤中的作用目前仅有少量报道且认识不一致。本研究采用免疫组化SP法对MMP2和PTEN在骨肉瘤组织标本中的表达及其相互作用进行了初步研究。
1 材料与方法
标本来源
收集青岛大学医学院附属医院骨科2001年1月~2005年6月手术切除标本,其中骨肉瘤标本40例,均经病理检查证实。40例病人中,男28例,女12例;(9~60岁)。Enneking外科分期:Ⅰ级8例,Ⅱ级21例,Ⅲ级11例。组织学分型:骨母细胞型16例,纤维母细胞型13例,软骨母细胞型7例,其他类型(血管扩张型、混合型)4例。选取同期青岛大学医学院附属医院病理科存档骨软骨瘤标本20例作为对照。标本均经100 g/L甲醛固定,常规石蜡包埋,3 μm厚连续切片。
检测方法
采用免疫组化SP法。鼠抗人MMP
2单克隆抗体和鼠抗人PTEN单克隆抗体以及SP试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术公司。实验步骤严格按试剂盒说明书进行。石蜡切片脱蜡至水, min,以微波枸橼酸盐进行抗原修复,正常羊血清封闭20 min,DAB显色,苏木精复染,脱水,透明,封片,中性树胶封固。用已知阳性切片作为阳性对照,用PBS代替一抗作为阴性对照。
结果判