文档介绍：PTEN在乳腺癌中的表达及其与转移的关系
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:赵刚韩冰杨明范志民赵光程
【摘要】目的通过检测PTEN基因在乳腺癌组织中的表达探讨其临床病理意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测PTEN在40例乳腺癌中的表达。结果乳腺癌组织与正常乳腺组织和癌旁组织PTEN的表达有显著差异(P<,P<)。PTEN在早期浸润性癌和晚期浸润性癌阳性表达率差异显著(P<);在淋巴结转移组与无淋巴结转移组检出阳性率差异显著(P<)。结论 PTEN表达与乳腺癌临床病理特征和生物学行为存在密切关系;PTEN基因是乳腺癌细胞增生活跃的重要影响因素。
【关键词】乳腺癌;癌基因;抑癌基因
乳腺癌是我国死亡率较高的恶性肿瘤,其发生发展是一个多基因、多阶段的变化过程。其中癌基因突变激活及抑癌基因失活起重要作用。PTEN基因为抑癌基因,其蛋白产物具有磷酸酶活性,调节细胞周期和增殖活性。国外学者近年研究发现PTEN基因及其蛋白表达与一些恶性肿瘤发生发展、生物学行为和预后有密切关系〔1~10〕。本实验拟采用逆转录聚合酶链反应(RT
PCR)分析并研究乳腺癌组织及淋巴结中PTEN表达及其与乳腺癌转移的关系,为乳腺癌诊治提供临床依据。
1 材料与方法
标本及临床病理资料我院2006~2007年间乳腺外科收治手术切除女性乳腺癌标本60例,年龄48~73()岁。肿瘤直径≤2 cm 者21例,2~5 cm者32例,>5 cm者7例。浸润性特殊癌2例(乳头状癌1 例、黏液腺癌1例);浸润性非特殊癌51例(浸润性导管癌42 例、浸润性小叶癌6例、髓样癌2例、硬癌1例);早期浸润性癌7例(早期浸润性导管癌6例、早期浸润性小叶癌1 例);Ⅰ期19例,Ⅱ期32例,Ⅲ期9例;淋巴结转移38 例,无淋巴结转移22 例。另取20例年龄45~70()岁女性乳腺癌根治术后癌旁腺体组织(距肿瘤边缘< 2 cm)和10例年龄44~68()岁乳腺良性肿瘤术后正常腺体组织(距肿瘤边缘>1 cm) 作对照组。标本离体后立即置于-80℃冰箱冻存。全部标本均经病理诊断证实。病人术前均未接受过化疗或放疗。
主要试剂总RNA提取试剂盒(Trizol)、逆转录试剂盒系Invitrogen产品均购自大连Takara公司。按GenBank的(PTEN)EST序列设计引物,PTEN基因(具体由大连宝生生物工程技术公司合成)上游引物:5′CAC AGA A GAC ATG ACA GCC ATC ATC3′,下游引物:5′GTG T CAT GGT GTT TTA TCC CTC TTG3′,扩增片段为1 209 bp〔2〕。内参βactin上游引物:5
′ACA CTG A TCT ACG AGG3′,下游引物:5′AGG GGC CGG ACT CGT CAT ACT3′,扩增片段为627 bp。PTEN登录号:NM058076。
方法采用RTPCR方法。按照试剂盒说明书提取RNA后对提取物进行含量及纯度分析。~。OD260/OD280=。取24 μ