文档介绍：P选择素在结直肠癌的表达及临床意义
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:晋雯,林志武,高美钦,杨代兴
【摘要】目的探讨P选择素在结直肠癌细胞的表达情况与临床病理关系及预后的意义。方法应用链酶素-生物素(SP)免疫组织化学法,对62例结直肠癌及5例正常肠黏膜进行P选择素的检测。结果 P选择素在正常组织中未见表达,%,其阳性表达与患者的性别、肿瘤的组织分型、分化程度均无关,与癌性血栓形成及Dukes分期有关()。P选择素阳性者5年生存率及平均生存期[%,(±)月]均低于P选择素阴性者[%,(±)月,]。结论 P选择素在结直肠癌中的高表达与肿瘤的转移潜能有关,对判断结直肠癌的预后有参考价值。
【关键词】结直肠肿瘤;P选择素;肿瘤转移;预后
选择素是新近发现的细胞黏附分子中一个家族,通过启动肿瘤细胞黏附的始动机制,介导肿瘤细胞与内皮细胞的黏附。其中P选择素存在于血小板与内皮细胞内,能介导内皮细胞和血小板与肿瘤细胞之间相互作用,可能与肿瘤的转移有关[1-2] 。笔者用免疫组织化学方法研究P选择素在癌组织中的表达,探讨P选择素在结直肠癌转移中的作用。
1 材料和方法
材料 1995-1998年福建省立医院资料完整的结直肠癌患者的存档标本62例。一般情况:男性30例,女性32例,年龄(±)岁(78~27岁)。选取5例正常肠黏膜为对照组。所有材料按照全国结肠癌协作组制定的标准[3] ,由两名病理医生复查确定。
主要试剂羊抗人单克隆抗体P选择素、SP试剂盒(北京中山生物工程公司)。
方法蜡块重新制成5μm厚切片,SP法检测P选择素,阳性对照选自已知的阳性片,阴性对照由PBS代替一抗。具体操作步骤如下:(1)切片烤箱烘烤60℃10min,常规二甲苯脱蜡至水化,蒸馏水洗5min;(2)()隔水蒸馏于高压锅内,待水沸腾,将切片放入修复液内,加盖、加热,喷汽计时3min,保留5min,自来水冲洗至37℃;(3)蒸馏水洗5min×2;(4)滴加A液,室温放置10min;(5)蒸馏水洗5min×2,PBS洗5min×1;(6)滴加B液,放置37℃水浴槽15min;(7)滴加一抗(1∶50),放置37℃水浴槽1h;(8)PBS洗5min×3;(9)滴加二抗放置37℃水浴槽10min;(10)PBS洗5min×3;(11)滴加D液,放置37℃水浴槽10min;(12)PBS洗5min×3;(13)DAB显色4~8min。
结果判断以血管内皮细胞细胞膜出现棕黄色为阳性,高倍镜下选择10个视野计数,血管≥5条为阳性,其中5~9条为“+”,10~19条为“”,≥20条为“”。
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2 结果
P选择素在正常肠黏膜中均未见有阳性表达。62例结直肠癌组织中阳性表达为42例,%。阳性表达主要位于中等大小的动静脉的内皮细胞的细胞膜上,毛细血管几乎未见表达。部分肿瘤细