文档介绍：检测血清血管内皮生长因子在预测肾母细胞瘤转移中的作用
【关键词】肾母细胞瘤; 血管内皮因子; ELISA法
0引言
肿瘤的生长、转移、及其转移部位的生长都有赖于肿瘤组织新生血管的生成[1]. 肿瘤血管的生成有多种血管生长因子参与. 如血管内皮生长因子(VEGF),血小板源性生长因子(PDGF),成纤维细胞生长因子(FGF),转化生长因子(TGF),表皮生长因子(EGF). 其中,VEGF在肿瘤的血管生成中起着极其重要的作用,可直接或间接刺激宿主的免疫细胞或基质细胞,促进内皮细胞的增殖或迁移,最终导致血管的生长[2]. 我们对35例Wilms瘤患儿血清VEGF含量检测,以探讨VEGF表达在预测Wilms瘤转移中的作用.
1对象和方法
我院小儿外科2001/2003手术的Wilms瘤患儿35(男20,女15)例,体质量(±) kg,年龄(~14)岁,平均(±)岁,根据其病理组织标本特点区分肿瘤的分化程度[3]见表1. Ⅰ期患者术后给予长春新碱,Ⅱ期患者术后给予长春新碱、更生霉素、并辅以放疗. Ⅲ期给予长春新碱、更生霉素、柔红霉素并辅以放疗. Ⅳ期给予长春新碱、更生霉素、柔红霉素、环磷酰胺治疗. 分别在术前、术后1 wk, 2 wk对VEGF蛋白的表达水平进行检测,在 4, 8, 16和32 wk随访Wilms瘤患儿. 选择健康儿童35(男22,女13)例[体质量(
±) kg,年龄(~15)岁,平均(±)岁]的血清做对照. 患儿与正常儿童组间年龄、体质量和性别等差异无显著性,(略)
. 采用双抗体夹心ELISA法检测. 原理: 抗人VEGF mAb包被于酶标板上,标本和标准品中的VEGF会与mAb结合,未结合物将被洗去. 加人生物素标记的抗人VEGF ,它将与结合在mAb上的人VEGF 结合而形成免疫复合物,辣根过氧化物酶标记的亲和素与生物素结合. 加入显色剂,若反应孔中有VEGF ,将有蓝色出现,加终止液变黄. 测A450 nm值,VEGF 浓度与A450 nm之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中VEGF浓度. 标本收集后冻存于-20℃,避免反复冻融. 具体操作严格按说明书进行.
统计学处理: 采用SPSS统计软件对数据进行处理,患儿术前、术后1 wk 和2 wk组间比较采用重复测量方差分析,患儿术前与对照组间比较和术后32 wk转移组与未转移组间比较采用t检验. P<,P<.
2结果
Wilms’瘤患儿术前血清VEGF含量显著高于与对照组儿童(P<),术后1 wk和2 wk时血清VEGF含量降低,与术前对照差异具有显著性(P<, 表1). 在4, 8, 16, 32 wk随访有 9例患儿肺转移,其中5例现已死亡. 转移患儿血清VEGF含量增高,与未转移患儿差异有显著性(P<, 表2).表235例健康儿童及不同分期的患儿在术前、术后血清VEGF的含量(略)
3讨论
肾母细胞瘤起源于未分化的后肾胚胎,可形成肾的各种成分,是间