醒脑静注射液对内毒素休克家兔血浆细胞因子含量的影响.doc

文档介绍：醒脑静注射液对内毒素休克家兔血浆细胞因子含量的影响
【摘要】目的:探讨醒脑静注射液治疗内毒素休克的可能机制。方法:日本大耳白兔18只,随机分为正常对照组、LPS组、LPS+XNJ组,每组各6只。采用耳缘静脉注射LPS复制兔内毒素休克模型,分别进行治疗,于治疗后0、1、2、3h观察各组平均动脉压(MAP)、心率(HR)、存活率,并取血用ELISA双抗体夹心法检测血浆TNF-α及IL-10的含量。结果:LPS组平均动脉压在0h后迅速下降,心率明显加快,2h后又迅速减慢;PLS+XNJ组平均动脉压在0h后平缓下降,心率先加快后平缓减慢。LPS组存活率为0,PLS+XNJ组存活率为100%。TNF-α的变化:LPS组TNF-α 0h开始增高,3h达到顶峰;LPS+XNJ组TNF-α在0h达到顶峰,1h明显下降,3h降至最低。IL-10的变化:LPS组IL-10在3h达到顶峰,PLS+XNJ组在2h达到顶峰,3h开始下降。结论:醒脑静注射液能治疗内毒素休克,其机制可能与调节促炎因子和抗炎因子的平衡有关。
【关键词】醒脑静注射液;内毒素;休克;TNFα;IL10
内毒素又称脂多糖(haride,LPS),是革兰氏阴性菌细胞壁外膜上的一种含有多糖和类脂的特殊物质。内毒素休克(Endotoxin Shock),是由革兰氏阴性菌内毒素引起的以发热、低血压及多器官功能衰竭为主要特征的综合征,死亡率高,是临床常见的危急重症之一,目前尚无令人满意的治疗药物。有研究证实[1-4],醒脑静注射液能通过抑制肿瘤坏死因子
α(TNFα)的表达,有效地抑制炎性级联反应,减轻内皮细胞损伤,清除氧自由基。本实验拟通过观察内毒素休克模型家兔血清中促炎因子TNFα及抗炎因子白细胞介素10(IL10)含量的变化,探讨醒脑静注射液抗内毒素休克的作用机制。
1 材料与方法
动物健康日本大耳白兔18只(合格证号:20054020),体重2-,雄性,清洁级动物,由泸州医学院实验动物科提供。
试剂醒脑静注射液购自河南天地药业股份有限公司;内毒素(LPS)购自美国Sigma公司;兔TNF-α、IL-10试剂盒,均购自上海西唐生物科技有限公司。
仪器 BL-420生物机能实验系统。
动物实验日本大耳白兔18只,随机分为正常组6只,LPS组6只,LPS+XNJ组6只。耳缘静脉注射1%戊巴比妥钠全麻,分离右颈总动脉,插管,BL-420生理仪观察并记录平均动脉压、心率变化。分离右侧股动脉插管放血。待10-20min平均动脉压稳定后记录平均动脉压、心率并定为记录0点。LPS组和LPS+
·kg-1,正常组推注等量生理盐水。待血压下降至正常的2/3后,·kg-1,正常组和模型组推注等量生理盐水。以上各组分别于推注后0、1、2、3h取血2ml,同时回输等量生理盐水。所取血以3000r·min-1离心10min,取血浆测TNFα及IL10的含量。
15 观察并计算动物的存活率
16 细胞因子(TNFα以及IL10)测定按试剂盒说明操作,设空白管、标准管和测定管,各管一式两份。450nm读取吸光值,绘制标准曲线,在标准曲线上读取各待测