文档介绍：陕西汉族人群和食管癌患者Rb基因的多态性
作者:舒青马群风秦鸿雁张宁
【关键词】 Rb基因
关键词: Rb基因;食管癌;易感性;多态性
0 引言
食管癌在我国常见,具高发区和家族聚集现象,陕西也为高发区之一,,李华川等[1] 在食管癌及其癌旁组织中均发现有Rb基因异常,,目前国内尚未见到对Rb(intron17)多态在中国人中的分布及其与食管癌遗传易感性相关性分析,为此,我们应用PCR技术,检测并分析了陕西正常人群Rb(intron17)VNTR多态分布,并以此为标记探讨与食管癌遗传易感性相关性分析.
1 材料和方法
材料陕西正常无血缘关系人群外周血标本52例,由西京医院血库提供;鳞状食管癌标本47例,癌旁组织31例,由唐都医院胸外科提供,经病理组织切片确诊.
方法 DNA抽提:取静脉血(3~5mL)或组织,采用蛋白酶K消化,酚/氯仿抽提法,,引物序列:A5’-TAA-CACGTTAACG-3’,B5’-TT-3’(美联公司合成).依次加入灭菌双蒸水,10×缓冲液3μL,引物各25pmol,dNTP200μmol・L-1 , DNA thermal :97℃变性10min,94℃(上海Promega公司),:94℃变性45s;48℃退火45s;72℃延伸1min,循环30次,最后1次循环72℃℃消化,用10g・L-1 琼脂糖凝胶电泳(Sigma公司)电泳,35V电泳1h,EB染色,紫外灯下观察并照相.
2 结果
陕西汉族正常人群在52名(104条染色体)Rb基因17内含子位点中发现:2种等位基因片段:945bp(A)及630加315bp(B),基因型频率:A/A:,A/B:,B/B:,基因频率:A:,B:(图1).在鳞状食管癌47例(94条染色体)Rb基因17内含子位点中发现:该位点也存在相同等位基因片段:基因型频率:A/A:,A/B:,B/B:,基因频率:A:,B:(χ2 =,df=2,P<,图2).在癌旁组织31例(62条染色体)中:有与癌组织相同的等位基因片段:基因型频率:A/A:,A/B:
,B/B:,基因频率:A:,B:,:6例(20%)癌组织在该位点发生突变,其中5例是由945bp突变为630bp和315bp(表1,图1).
3 讨论
Rb基因位于染色体13q14,是隐性抑癌基因,两个Rb基因均发生突变,丧失功能时才导致肿瘤的产生