文档介绍：:..遗传学实验报告8转基因果蝇的杂交重组实验丛乐2005011007生51班实验组:1-1同组成员:朱祎实验日期:2008年3月〜,进行转基因杲蝇的杂交重组实验,按照预定实验方案设计进行果蝇麻醉,处女蝇挑选,果蝇转移和杂交等操作,并按时观察和记录果蝇的状态、牛理特征等信息,并鉴定杂交重组结果。,并通过Balancer的作用得到能够稳定保存的品系。,验证初始实验设想,从而加深对果蝇遗传特征的理解和认识。,基本假设和设计思路本次实验的设计基于转基因果蝇(TransgenicFly)和带有平衡子(Balancer)的果蝇。、P转座子序列、mini-white基因的质粒通过显微注射转入白眼果蝇卵中,可以获得转基因果蝇(此步操作由唐师姐提前完成,并提供给我们)。质粒上所带的mini-white基因(转基因标记)可使得成功插入目的基因的果蝇个体呈现出红眼(RedEye)表型。由于mini-white的表达量直接决定果蝇眼睛红色的深浅(取决于目的基因插入位置和拷贝数目),所以可以通过检测果蝇眼睛的颜色直接对目的基因的插入情况进行初步判断和鉴定。稳定遗传詁系的获得则用到带SM6a平衡子(SM6aBalancer)的果蝇。带有该平衡子的果蝇相应的第2号染色体在减数分裂时不能发生重组,从而使得另一条染色体上的基因稳定遗传。该平衡了的有关信息请参见下表lo表1本次实验中使用的SM6aBalancer的遗传学信息染色体(Chromosome)平衡子(Balancer)显性表型标记(DominantPhenotypicMarker)纯合体特征(HomozygoteCharacteristics)2SM6aCy(卷翅)纯合致死(HomozygousLethal),通过同源重组可以将插入不同品系上的两个目的基因整合到同--条染色体(即2号染色体),并可将重组系和带有SM6aBalancer的品系杂交,筛选获得可稳定遗传的重组系。,这两个纯合胡系中目的基因A和B均位于第2号染色体上,且果蝇眼睛的颜色均为红色。具体杂交方案如下:第一步,将切品系(基因型?A/A)和tL品系(基因型gB/B)进行杂交,得到F1代,即tHL(基因型A/B),F1果蝇眼睛颜色为橙色。因为此次杂交使用的是两种纯合詁系,所以预期F1所有个体的表型和基因型均完全一样。第二步,(基因型?A/B)与带有SM6aBalancer品系的雄性果蝇(基因型(?SM6a/O)杂交,避免雄性不重组现彖,可得到所需F2代果蝇。在F2代中,如果其亲木tHL雌性果蝇(基因型辛A/B)的第2号染色体在减数分裂过程中发生同源重组,使得A和B两个目的基因交换到同一条染色体上,则会产生AB型和0型的卵子,从而最终得到所需要的tns品系果蝇(RS:binantStable,基因型AB/SM6a),此类果蝇的表型判断依据为眼睛颜色呈