文档介绍：日期:矽‘哆苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名:
期:海骸荻苏州大学学位论文使用授权声明日期:如玎。旷。碜本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定,即:学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所蚍绞莸缱映霭嫔、中国学术期刊馀贪电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在年月解密后适用本规定。非涉密论论文作者签名:导师签名:日
时减少细胞因子也.⒁惨拓阋粂的分泌,该抑制途径参与的免疫调节在肿瘤免疫、可溶性肿釉诜伟┫赴庖咛右葜械作用及机制研究中文摘要随着肿瘤分子生物学及遗传学的快速发展,人们逐渐认识到包括肺癌在内的恶性肿瘤的发生、发展、局部侵袭和远端转移是一个多步骤、多基因参与调控的复杂生物学过程,具有协同累计效应且与患者机体的免疫功能密切相关。此外,在恶性肿瘤患者体内具有复杂而异质性的肿瘤微环境,导致只有某些进入淋巴管或血管的瘤细胞亚群得以优势生长,获得转移表型。而这些具有高转移潜能的瘤细胞如何逃避机体免疫系统的监视、抵御抗原特异性赴鄙俗饔玫幕粕形赐耆ú鳌R虼耍苯裱芯除了需研发有效的分子检测技术对肺癌患者做出临床早期诊断外,还需对在肺癌发生、发展和免疫逃逸中发挥重要作用的信号途径及靶分子进行深入研究。近年来,通过对肿瘤免疫耐受和逃逸机制的广泛而深入的研究发现,参与机体免疫调节的协同刺激分子的表达异常在肿瘤的免疫逃逸中扮演着重要角色。近几年,/协同刺激分子家族成员不断扩大,一疨作为/协同刺激分子超家族的新成员,可以介导负性协同刺激信号,能有效抑、赴δ芎驮鲋常自身免疫、病毒感染、移植免疫等疾病的研究中都具有重要意义。越来越多的研究发现,许多协同刺激分子能分别以细胞膜型和可溶性两种形式存在,包括、、、和等。临床研究显示,许多可溶性协同刺激分子的表达水平具有诊断或疾病预后判断的价值。患者肿瘤组织表达的部捎糜谀承┲琢隽俅擦菩У牟慰贾副辍D壳埃蛉狈τ行У募觳夥椒ǎ内外鲜有对可溶性难芯勘ǖ馈=】等嘶迥谑欠翊嬖趕蜃樱该可溶性因子在肿瘤患者尤其是肺癌患者体内表达水平是否出现异常及其生物学意义尚无深入研究,值得进一步探讨。本研究收集临床肺鳞癌患者的组织标本,通过体外克隆化培养和筛选建立了人肺鳞癌细胞系,同时,体外实验研究发现肺鳞癌细胞系高表达人肿樱移渫可溶性至嗽诜伟┫赴庖咛右葜械淖饔眉盎蒲芯
一、人肺鳞癌细胞系的建立及其通过一疨抑制途径对赴学功能的调节作用过—疨抑制途径对赴镅Чδ芊⒒痈盒缘鹘谧饔茫挥τ每翁庾樽灾餮发的特异性检测的逑刀粤俅卜伟┗颊呖U股钊胙芯浚觳鈙在肺癌患者外周血的表达水平,分析其各项临床诊断指标的相关性,揭示该因子的表达水平与肺癌发生、发展的关系,探讨是否可以作为肺癌患者临床诊断、疗效预测和预后判断的依据,以W饔冒械悖7伟┑牧俅仓瘟铺峁┮恢中碌免疫干预手段,在此基础上,进一步探讨对免疫细胞的调节机制。【目的】利用肺鳞癌组织分离并体外克隆培养建立人肺鳞癌细胞系,分析人分子在肿瘤细胞上的表达特性并探讨一疨抑制途径对人馨拖赴纳镅功能的影响。【方法】选取临床病理确诊为肺鳞癌的患者,取其术后的新鲜组织标本经体外研磨分离形成单细胞悬液,体外培养并进行反复筛选和多次克隆化获得能稳定生长繁殖的肿瘤细胞系;应用单克隆抗体标记和流式细胞术检测该细胞表面肿拥谋达特性;采用密度梯度离心分离法和细胞纯化试剂盒获取人外周血赴挥用羧敕ㄌ逋庋芯縋对赴鲋澈突罨囊种谱饔茫挥τ肊方法检测蚑型细胞因子的表达水平,探讨肿瘤细胞产生免疫逃逸的机制。【结果】肺鳞癌患者的组织标本经体外分离、培养和筛选,可以获得能稳定生长繁殖的细胞系,该细胞系具有肿瘤细胞的生长形态和特征,能在体外培养环境中持续存活增殖;应用流式细胞仪检测分析该细胞表面谋泶锾匦裕峁允荆琍在人肺鳞癌细胞呈组成性高表达;体外实验发现,该细胞能够通过一疨信号抑制馨拖赴脑鲋澈突罨桓醚芯炕狗⑾直泶颬姆瘟郯┫赴捎行б种芓细胞产生、几、几一和Ⅲ梗衾米瓒闲涂谷薖抗体阻断该负性信号则可以部分恢复赴置谙赴蜃拥哪芰Α【结论】人肺鳞癌细胞的建立和鉴定为该类肿瘤的研究提供了物质材料,同时,组成性高表达人肿拥南赴档幕竦媒=徊教逋庋芯縋/种仆径在人肺鳞癌细胞