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日期:Ⅵ年名月偃湖南大学学位论文原创性声明学位论文版权使用授权书期:≯月沁年拢琯日本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其它个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于⒈C芸冢年解密后适用本授权书。⒉槐C芡拧朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉埃日期:导师签名:
伽綣基因的启动子活性,能够调控虻氖笨毡泶锾匾煨裕刂摘要示,蚈个蛋白都定位在细胞膜上。仉鬔个新基因,将其命名为⒚魅妨朔軩是在水稻沂玖素隓基因的时空表达特性及其编码蛋白的亚细胞定位,初步个;R泼傅膍和;,很多水稻基因的功能已经陆续被报道,但型锌指蛋白基因在水稻中的具体功能还研究甚少,大部分基因功能未见报道。因此,本文对水稻中型锌指蛋白开展了生物信息学分析及基因功能研究,获得了如下主要研究结果:捎猛炊员鹊姆绞娇寺×个新的型锌指蛋基因M过同源对比的方式找到了水稻中与调控拟南芥的分枝基因嗦氲陌被酸序列高度相似的型锌指蛋白基因,长度约2捎技术克隆蚴狈⑾至艘惶醮笮≡的弱带和一条笥业牧链庑蚪峁允菊馓趿链谴觨蚩7旁亩量蚶去掉位点之间的笫S嘈蛄械钠唇咏峁K型暾目7旁亩量蚯能够通读。但是该基因在数据库中没有收藏,说明这是我们克隆获得的一体内的另一种剪接方式。利用生物信息学方法分析了蚾·暮怂峒捌浔嗦氚基酸序列,利用同源建模方法构建了蚈鞍椎娜峁模型。研究发现蚈际悄さ鞍祝渲蠴存在个主要的跨膜结构域和一个次要的跨膜结构域,而有四个主要的跨膜结构域和一个次要的跨膜结构域。龅鞍锥季哂蠨、.蚑基转移酶活性。考察了蛟谛财扔Υ鹬兴⒒拥淖饔谩C魅妨薕是在水稻体内的另一种剪接方式,但主要以募艚臃绞皆植物体内发挥作用。分析发现该基因的启动子上存在很多与光、冷、热、旱、盐等胁迫和煊ο喙氐乃呈阶饔迷<.峁允続处理芰涞挠苗后,该基因的旨艚臃绞絤淖鼙泶锪肯啾却砬霸黾恿叮得该基因的转录受挠盏肌融合蛋白在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析显实验结果表明所克隆的蛏嫌蔚腄片段具有完整的该基因在胚和叶脉中高量表达。犁锌指蛋白基冈谒局晷凸菇ㄖ械墓δ芊治
仍譐基因分成,和綜等危直鹂寺〉系统地研究了该基因的功能,并发现了它是们基因在水稻体内的另一锰逋庵刈榈鞍缀徒湍感翁鄄种方式证明了鞍锥季哂蠸一酰基转移酶活性。第一种方式是构建了载体甇和甇·⒍哉个基因编码蛋白进行了大肠杆菌表达,纯化得到了大量可溶的重组蛋白,。另一种方式是构建了载体籓和甇⒆;ü湍感翁鄄烊范苏个基因的;R泼傅幕钚浴菇藀,甇过表达载体和甊扇旁靥澹ü└司居俗橹姆椒ㄗ;局花。过表达的转化纯合子表型表明;蛑仓甑姆洲潦纫吧驮加了%.%,亩产比野生型增加了%,而转基因植株没有较野生型在分蘖和产量上都没有明显的变化。干扰甊仓甑淖;合子表型显示泶锪拷档投苑洲潦筒棵挥忻飨缘挠跋臁同时我们构建了甇的过表达载体转化拟南芥,纯合子表型与前述表型一致。这些结果说明闹饕9δ苁峭ü黾臃洲枝垂菇ê理株型从而增加作物的产量。髁薕的功能域是含有锌指结构域的=泶镌靥迳喜⒆;饽辖妫亢献颖硇拖允景蠨峁褂虻的转基因植株的分支数比野生型增加了叮隣的全长泶锬饽辖娴谋硇鸵恢拢纱丝芍8没虻墓δ苡蛴Ω檬呛蠨峁域的片段。综上所述,本研究首次克隆了鲂碌腄托恐傅鞍谆騉,种剪接方式,但主要以庵旨艚臃绞皆谒咎迥诜⒒哟俳痉洲痢构建合理株型以增加水稻产量的功能。明确了该基因在胚和叶脉里高量表达,且受盏急泶铩Mü街址绞街っ髁薕具有;R泼傅幕钚浴T拟南芥中分段表达虻慕峁允酒涔δ苡蚴呛蠨恐附峁褂的8没虻墓δ苎芯课=ɡ蠢没蚬こ坦菇ê侠碇晷痛佣岣咦魑锊提供了理论依据,具有一定的理论价值和现实的指导意义。关键词:篛恢晷停幻富钚约觳猓患艚臃绞剑环洲潦还能域;表达模式博士学位论文
甌瑆型锌指蛋白基冈谒局瓿诠菇ㄖ械墓δ芊治甅甅琲甋.,·瑆畐,甌瓵,.瓸甌:疍狢琣甌,瑃,瑃,..