文档介绍：中南民族大学
硕士学位论文
中药小分子与牛血清白蛋白的相互作用
姓名:王斌
申请学位级别:硕士
专业:分析化学
指导教师:杨天鸣
2011-05-27
中南民族大学硕士学位论文
摘要
药物小分子与血清白蛋白(SA)之间的相互作用研究对阐明药物小分子在体
内的转运、分配及代谢过程、解释蛋白质结构和功能的关系以及开发新药等具有
十分重要的意义。近些年来,小分子和生物大分子之间的相互作用已引起各方广
泛的关注。本文主要研究了从中药食凉茶中提取的小分子与牛血清白蛋白
(Bovine Serum Albumin,BSA)之间的相互作用,以从分子层面了解中药小分子的
生物学效应和功能。本文主要结构如下:
第 1 章:绪论,此章简要的介绍了国内外的小分子和生物大分子相互作用的
研究对象,研究内容、意义、思路、手段,以及研究过程中存在的不足。阐明了
立题的依据。
第 2 章:此章作者采用荧光光谱法,在 25℃和 37℃两个温度下,测定中药
小分子和牛血清白蛋白的相互作用,实验结果显示在接近人体生理条件下
(pH=),中药小分子与牛血清白蛋白存在静态猝灭作用,两者之间的相互作
用引起牛血清白蛋白的最大发射峰峰位蓝移;根据 Stern-Volmer 方
程:F0/F=l+Kqτ0[Q]=l+Ksv[Q]得到 Ksv=×104(T=298K) ×104(T=310K)
Kq=×1012(T=298K) ×1012(T=310K),通过方程 Lg((F0-F)/F)=lgK+nlg[Q]
计算求得在上述两个温度下的表观结合常数 ×104(T=298K) 和
×104(T=310K)及结合位点数 n=1,通过热力学方程,得出△H>0、△S>0,根
据 Ross 的结论可知两者之间是疏水作用力,通过同步荧光光谱法在波长差是
15nm 时,荧光峰紫移了 2nm,说明中药小分子和 BSA 发生静态结合,在波长差
60nm 时,荧光峰没有发生位移,由此,我们可知中药小分子距离酪氨酸残基较
近,而距离色氨酸残基较远。
第 3 章:此章作者采用紫外-可见光谱法,在室温条件下,利用紫外-可见光
谱法研究了中药小分子与牛血清白蛋白之间的相互作用,实验结果表明二者之间
形成了复合物,两者之间的这种结合使牛血清白蛋白发生了荧光猝灭,
BSA~280nm 的吸收峰是其肽链上的色氨酸和酪氨酸的芳杂环上的π-π* 跃迁引
起的,BSA~280nm 的吸收峰的吸收强度随小分子浓度的增加而增加,吸收峰发
生紫移。BSA~230nm 的吸收峰则是由肽键的羰基(C=O)的 n-π*的跃迁所引起的,
吸收峰的吸收强度随着小分子浓度的增加而增加,BSA~230nm 吸收峰发生红移。
第 4 章:此章作者应用傅立叶红外光谱法,在室温条件下,应用傅立叶红外
光谱法研究中药小分子与牛血清白蛋白之间的相互作用。实验结果显示中药小分
子-牛血清白蛋白复合物在 -1 出现一个新的红外吸收峰,佐证了中药小
分子和牛血清白蛋白是通过静态结合的。此外,牛血清白蛋白的酰胺 I 带的吸收
峰 -1,发生了微小的紫移至 -1,牛血清白蛋白的酰胺 II 带的吸
收峰 -1,发生了微小的红移至 -1,BSA 的酰胺 III 带的吸收峰
-1,发生了较大幅度的红移至 -1,除了上述的酰胺三个带发生
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变化外,还有由 -1 红移至 -1,-1 红移至 -1,由
此我们得知,中药小分子和 BSA 发生静态猝灭。
关键词:牛血清白蛋白;相互作用;荧光光谱;紫外-可见光谱;傅立叶红外光
谱
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ABSTRACT
The interaction between serum albumin and bio-active molecular has attracted
great interests among researehers since several drug-protein has
important effeet on the distribution,free concentration and the metabolism of drugs in
the ,studies on th