文档介绍:学校代码:10184分类号:理学硕士学位论文新型N-连接糖链受体的合成及其MALDI-TOF-eptorsfortheresolutionofN-harideandtheanalysisofglycoproteinsbyMALDI-TOF-MS汪素芳分析化学延边大学理学硕士学位论文新型N|连接糖链受体的合成及其MALDI|TOF|MS测定糖链的应用汪素芳2011分类号密级UDC学号2008010560延边大学硕士学位论文新型N-连接糖链受体的合成及其MALDI-TOF-MS测定糖链的应用研究生姓名汪素芳培养单位延边大学指导教师姓名、职称金东日教授学科专业分析化学研究方向药物分析论文提交日期2011年4月18日本论文已达到理学博(硕)士学位论文要求答辩委员会主席(印)答辩委员会委员(印)答辩委员会委员(印)答辩委员会委员(印)答辩委员会委员(印)延边大学2011年*月*日学位论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标记和致谢的部分外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含本人为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人如违反上述声明,愿意承担由此引发的一切责任和后果。研究生签名:日期:年月日学位论文使用授权声明本人在导师指导下所完成的学位论文,学校有权保存其电子和纸制文档,可以借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容,可以向有关部门或机构送交并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密论文,按保密的有关规定和程序处理。本学位论文属于:¨,在年解密后适用于本声明;¨。研究生签名:导师签名:日期:年月摘要近年来,人们研究发现N-连接糖链与细胞癌症的发生和转移以及造血功能损伤有密切关联,因此对于N-连接糖链的结构与生物功能方面的研究日趋引起学者们的关注。但是,由于糖分子本身不含有π-共轭结构,因而不能对其进行紫外或者荧光检测;同时由于已经开发出来的衍生试剂总是存在衍生反应难控制或者质谱检测灵敏度低等问题,不能很好地满足当前糖生物学分析的需要。因此,继续研究开发新的高灵敏衍生化试剂及方法有着重要意义。本论文重点研究了四种含有Boc-Asn-Ac单元的新型受体对糖类物质进行衍生化以及MALDI-TOF-MS分析。对反应条件和质谱检测条件进行了优化,对检测方法进行了考察,并用该衍生化方法对实际样品卵清蛋白进行了分析,取得了较好的效果。本工作主要取得了以下的研究结果:合成了4种用于检测N-连接糖链的有机受体,优化了各受体的合成条件以及纯化方法,并对目标化合物进行了核磁、质谱、紫外、熔点等表征。由于内切酶Endo-Ac-Ac-Asn之间的糖苷键,使复杂的糖肽转变成寡糖链。我们利用所合成的受体对寡糖链进行修饰,进而实现对样品中寡糖的分析及检测。初步探讨了在Endo-M作用下4种受体对唾液酸糖肽中的寡糖的检测和对实际样品卵清蛋白中N-连接糖链的检测。由于所合成的受体易离子化或已带电荷,所以可以很大程度地提高糖链衍生物在质谱检测器上的检测灵敏度。我们还将合成的衍生化试剂MDPZ应用于检测羧酸类物质,摸索了衍生化方法,并建立了一种简便、快速的MS检测方法。关键词:N-连接糖链;内切酶乙酰葡萄糖***酶;衍生化试剂;基质辅助激光解析电离质谱AbstractInrecentyears,manyfindingshaveshowedthatN-,thestudybetweenstructureandbiologicalfunctionofN-,duetolackingπ-pounds,theassayofultravioletorfluorescencedetectorisn’ttakendirectly;Moreover,harideanalysis,,harideanalysisinac