文档介绍：学生毕业论文
题目:复合诱变选育碱性蛋白酶高产菌株

复合诱变选育碱性蛋白酶高产菌株
摘要
以枯草芽孢杆菌为出发菌株,通过紫外线和亚硝酸钠复合诱变,筛选碱性蛋白酶高产突变株,并进行液体发酵筛选试验。从大量突变株中进行筛选,获得1株遗传性稳定的碱性蛋白酶高产突变株D-5,,,提高258%。
关键词:枯草芽孢杆菌;碱性蛋白酶;诱变育种
Composite mutagenesis breeding high alkali protease strain
Abstract
With bacillus subtilis strain for starting, through the ultraviolet ray and sodium posite mutagenesis, screening alkali protease high yield mutations, and solid state fermentation screening test. From a large number of mutations in screening, get 1 strain of ic stability of the alkali protease high yield mutations D-5, the enzyme activity of the bacteria by , rising to , increased by 258%.
Keywords: bacillus subtilis; Alkali protease; Mutation breeding
1 引言 4
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简介 4
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感光胶片工业 5
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影响因素 6
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2 材料与方法 6
实验材料 6
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实验所用试剂 7
实验所用器材 8
实验方法 8
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孢子悬浮液的制备 8
物理诱变—紫外线诱变 8
化学诱变—亚硝酸钠 9
—Folin 酚法 10
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紫外线诱变筛选结果 14
亚硝酸钠诱变筛选结果 14
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亚硝酸钠诱变结果 15
4遗传稳定性研究 15
结论 15
参考文献 18
1 引言
随着遗传学和分子生物学领域的飞速发展, 许多新型复杂的技术被应用于菌种选育, 如原生质体融合育种技术和基因工程育种技术等, 但是诱变育种技术仍是提供菌株生产能力的重要有效手段。它获得的正突变率相对较高,可以得到多种优良突变体和新的有益基因类型。另一方面,诱变育种存在一定的盲目性和随机性,在实际应用中,研究者应根据出发菌株及实验室条件等具体情况来选择合适的诱变方法。本实验室将物理因子和化学因子结合起来对多种酵母菌株进行复合诱变,均得到了理想菌株。此外,我们正在尝试反复采用几种诱变因子进行多次诱变,以期得到更为理想的菌株。
碱性蛋白酶概述及简介

碱性蛋白酶是在碱性范围内水解蛋白质肽键的酶类,最适值pH为9~11,属内肽酶中的丝氨酸蛋白水解酶类。是商品蛋白酶中应用最速度快、收效显著和方法简便等优点,因此,在科学广、产量最大的一类蛋白酶,是商业上非常重要的实验和生产上都得到了广泛的应用,目前仍然是最主酶类。
简介
早在1945年瑞士Dr,Jaag等发现微生物碱性蛋白酶便开创了碱性蛋白酶应用的新纪元,使其有可能工厂化生产,更可能广泛用于洗涤剂和皮革脱毛。在我国,60年代末选育出产碱性蛋白酶的2709菌并于1971年投产,目前,它已成为研究比较深入的一种酶类,同时也是酶制剂工业的主要产品。近几年来,由于酶制剂厂和洗涤剂工业迫切要求品种生产碱性蛋白酶,故它的发展很快并研制出了一批产酶量较高的菌株,如C1213地衣芽抱杆菌、B45嗜碱性短小芽抱杆菌、53-G38-6地衣芽抱杆菌,PH4一18。地衣芽抱杆菌等。

碱性蛋白酶广泛存在于细菌、放线菌和真菌