文档介绍：过柱子的经验总结  
 单一溶剂的极性大小顺序为:
石油醚(小)→环己烷→四***化碳→三***乙烯→苯→甲苯→二***甲烷→***仿→***→乙酸乙酯→乙酸甲酯→***→正丙醇→甲醇→吡啶→乙酸(大)
混合溶剂的极性顺序:
  苯∶***仿(1+1)→环己烷∶乙酸乙酯(8+2)→***仿∶***(95+5)→苯∶***(9+1)→苯∶乙酸乙酯(8+2)→***仿∶***(9+1)→苯∶甲醇(95+5) →苯∶***(6+4)→环己烷∶乙酸乙酯(1+1)→***仿∶***(8+2)→***仿∶甲醇(99+1)→苯∶甲醇(9+1)→***仿∶***(85+15)→苯∶***(4+6)→苯∶乙酸乙酯(1+1)→***仿∶甲醇(95+5)→***仿∶***(7+3)→苯∶乙酸乙酯(3+7)→苯∶***(1+9)→***∶甲醇(99+1)→乙酸乙酯∶甲醇(99+1)→苯∶***(1+1)→***仿∶甲醇(9+1)
 
 
过柱子经验总结 
1, 选柱子:现在见到的柱子径高比一般在 1:5-10.
 
2, 称量:100-300 目硅胶,称 30-70 倍于上样量;如果极难分,也可以用 100 倍量的硅胶书中写硅胶量是样品量的 30-40 倍,(是指在所需组分 Rf 在 --,杂质相差 以上) , 就可以少用硅胶.
 
3, 选洗脱剂:一般淋洗剂是采用 TLC :石油醚系统;极性较大的用甲醇:***仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇: Rf 值在 - :石油醚<环己烷/己烷<苯***<***仿<乙酸乙酯<正丁醇<***<乙醇<甲醇<水. 一般把两种溶剂混合时, 采用高极性/低极性的体积比为 1/3 的混合溶剂. 拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸. 乙酸乙酯/石油醚= 4:1 可用 TLC (60-90).
 
4, 搅成匀浆:先把硅胶泡在烧杯中,用干硅胶体积一倍的溶剂泡,用超声波超半个小时,/***体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是***仿/醇体系,就用***仿拌.
 
5, 装柱: A, 用溶剂把柱子饱和一次, 因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量可能使产品分解. B,将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约 1/3 体积石油醚(***仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(***仿)将其冲入柱中. C,装柱时一定要保证无气泡,同时敲打柱体使柱体更均匀,紧凑,装毕,用洗脱液冲三次.
 
6, 压实:装柱完后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定. 柱床约被压缩至 9/10 ,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂.
 
7, 上样:干法湿法都可以. A,在硅胶上层加少量无水硫酸钠(以免样品被洗脱剂冲散),加入一些洗脱剂,,而不会冲坏硅胶表面. B,用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离(2~4cm 就够了) ,再加压,这样避免了溶剂(如二***甲烷等)夹带样品快速下行.
 
8, 过柱和收集:,:10mg 上样量,1g 硅胶 H, 收集馏分;1-2g 上样量,50g 硅胶(200-300 目) ,20-50ml ,会被淋洗剂带到产品中的.
 
9, 用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开.
 
10,,如果仅用紫外灯,会损失较多产品,紫外的灵敏度一般比喷显剂底 1-2 个数量级.
 
11, 送谱. 收集的产品旋干, 在送谱前通常需要重结晶. 如果样品太少或为液体, 可过一小凝胶柱, 左右所谓的"硅胶"峰.
 
过柱子的经验
常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。柱分的经验成分太多。
 柱子可以分为:加压,常压,减压。
 压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最