文档介绍:琼脂糖凝胶电泳实验原理实验仪器、材料与试剂实验步骤注意事项与实验技巧一、实验原理(1)某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的速率,电泳的速率与核酸分子大小和构型有关。DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动。分子质量越小跑得越快,紧密构型快于松散型开环分子或线性分子,从而可以分离大小不同的DNA或RNA分子。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应。不同DNA的分子量大小及构型不同,电泳时的泳动率就不同,从而分出不同的区带。(2)琼脂糖是一种线性多糖聚合物,可以形成具有刚性的滤孔,凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。浓度越高,孔隙越小,其分辨能力就越强。分离长度凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳200bp—近50kb聚丙烯酰胺凝胶电泳5—500bp分辨率高采用不同浓度的凝胶可以分辨范围广泛的DNA分子。含不同量琼脂糖的凝胶的分离范围凝胶中的琼脂糖含量[%(W/V)]DNA/RNA分子的分离范围(kb)———————2二、实验仪器、材料与试剂质粒样品、酶切样品和PCR样品。凝胶电泳系统和电泳图像分析系统(凝胶成像系统)等。琼脂糖、1XTAE电泳缓冲液、溴化乙锭、6X载样缓冲液(6Xloadingbuffer)和DNA分子量标准等。凝胶电泳系统DYY-6C型 双稳定时电泳仪电源(北京六一)输出范围(显示分辨率):6-600V(1V)     4-400mA (1mA)     240W美电泳槽Mini-SubCellGTCell凝胶成像分析系统