文档介绍：基因扩增(PCR)实验室辽阳鑫宇实验室设备安装工程有限公司技术部前言基因扩增检验实验室一文,是根据国家有关法律、法规和技术规范,进行选编、择录和收集有关资料、文章而编写的。选编和择录有关技术规范等,如有错误是编著人理解有误,编者表示歉意。本文的平面图由黄海江、效果图赵玉、录入周悦同志完成。柏松枫、何兴福、张璐、张伟卓、赵馨、赵俨、熊洁萌等编写。陈洪柱参与校对。总经理郎宪明(高级工程师)编导。本文为内部参阅资料,仅供参考。2015年2月基因扩增(PCR)实验室基因扩增检验方法(简称PCR)灵敏度高、特异性强、精确快捷、适用范围广等特点。在生物学、医学科学研究、转基因产品、临床检测、疾病与动物疫病预防和控制、公安侦查等相关专业和学科广为应用。但是,PCR检验实验室应用时需保证实验安全、设置合理的实验室、规范的操作程序和严格的管理制度。 近几年,对PCR实验室建设越来越得到重视,因为对检测结果的可靠性、准确性和安全性起到至关重要作用,PCR实验室设计核心问题是如何避免污染。实验室的平面布局、空调通风系统运行、气流控制等都是围绕防止污染这个核心进行设计和建设。 ,也可以是组合形式,现在主要是以组合形式为主。,又有一定的间距,不会造成区间干扰,因此没有特定要求。由于工作流程的不便利,在新组建的PCR实验室时往往不被采用。,形成一个组合形式完成基因扩增分析的PCR实验室,各区间在物理空间上完全相互独立,各区间无论是在空间还是在使用中,始终处于完全的分隔状态。但是,各实验区间集中布置,容易造成相互干扰,因此对总体布局以及屏障系统具有一定要求。对实验室的空调通风系统、气流流向、大气压力、人物流程等方面,在实验室设计和装修上需进行合理考虑。 PCR实验室可分两个工作区域:核酸扩增前区和核酸扩增后区。核酸扩增前区包括试剂准备区和样品处理区,设在不同房间或区域;核酸扩增后区包括扩增区和产物分析区,设在不同房间或区域。,如采用聚合酶联反应:则设置试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区四个单独的工作区域。样品需要粉碎处理的,还需增设样品粉碎区;若使用实时荧光PCR法:基因扩增区、基因产物分析区可以合并;采用标本处理、核酸提取及扩增检测为一体的全自动化PCR分析仪,则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并为一个区域,因此PCR实验室原则上设置五个区或四个区或三个区或二个单独的工作区。,但必须在满足下列要求的前提下:,试剂配置在超净工作台中操作,样品处理在生物安全柜内操作。,如实时荧光PCR仪等。、耗材、移液器和盛放污染物的盛器。。、器具、仪器和设备为该区专用,不得交叉使用。::扩增试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的制备以及离心管、吸头等消耗品的储存和准备。:样品登记、处理和分装;核酸(RNA/DNA)提取、保存和使用;PCR扩增的第一轮加样。对于涉及样本的操作应符合生物安全二级实验室防护标准或更高。:cDNA合成和DNA扩增。如果在此区进行套式PCR的第二轮加样,应在PCR防护罩内进行。:扩增产物的电泳、杂交、成像、序列测定、变性高效液相分析、结果分析、登记及报告。。-8℃和-20℃以下的冰箱、普通离心机、超净工作台、混匀器、微量加样器(-1000μL),消耗品(一次性手套、耐高压处理的离心管和加样吸头)、专用工作服工作鞋(套)、专用办公用品和废弃物容器、可移动紫外线灯。-8℃冰箱、-20℃(或-80℃)冰箱,生物安全柜、高速制冷离心机(台式)、混匀器、恒温水浴箱或加热模块、制冰器或制冷模块、微量加样器、消耗品(一次性手套、耐高压处理的离心管和加样吸头)、专用工作服工作鞋(套)、上下水设备、专用办公用品和废弃物容器、紫外线杀菌灯。如需处理大分子的DNA应具有超声波水浴仪。、微量加样器、消耗品(一次性手套、耐高压处理的离心管和加样吸头)、专用工作服工作鞋(套)、