农杆菌注射烟草转化..doc

文档介绍：µl质粒加入50µl刚冻解的农杆菌感受态中(提前准备1mlLB培养液,,电击杯,移液枪,枪尖等)。★感受态易失效,,(不要产生气泡),放入电击仪(-)。,混匀,并吸至新的离心管中。℃,摇2h(过程中可以准备抗性板子,或提前准备)。,(使用kan+rif双抗板)28℃培养36h。,同时做菌种保藏(根据实验需要)。,27℃摇菌过夜。★µl菌液到20mlLB培养基中,(20mlLB+100ml/LMES+20µmol/LAS+500µlkana/L)-。●不加Rif★准备两份,最后调OD值会用到。,10min弃上清。(H2O+MES10ml+MgCl210ml+AS1ml),现配现用。用等量缓冲液重悬菌液。一份等量,,室温放置1h。将需要混合的菌液等体积混合,可注射。