文档介绍：实验十-血糖的测定————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期: 实验十血糖的测定血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定,~。血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一,有着双重实际意义:其一,维持稳定的能源供给,满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二,保证机体不因进食致血糖浓度过高,导致糖的丢失。因此,血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及反应原理的不同,大致分三类:氧化还原法,缩合法(主要有邻甲苯***法),酶法(主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法)。下边介绍两种方法供选择。一、葡萄糖氧化酶法【目的】,能进行血糖测定的操作。。【原理】葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GOD)能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后者在过氧化物酶(peroxidase,POD)作用下,分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物,即Trinder反应。其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比,在505nm波长处测定吸光度,与标准管比较可计算出血糖的浓度。反应式如下:【器材】试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计【试剂】 () ,用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L盐酸),然后用蒸馏水稀释至1L。 ,葡萄糖氧化酶1200U,4-氨基安替比林10mg,叠氮钠100mg,溶于上述磷酸盐缓冲液80ml中,用1mol/,加磷酸缓冲液至100ml。置冰箱保存,4℃可稳定3个月。 (酚在空气中易氧化成红色,可先配成500g/L的溶液,贮存于棕色瓶中,用时稀释),用棕色瓶贮存。 ,4℃可以存放一个月。 ,加温助溶,冷却后加蒸馏水至1L。(100mmol/L),溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中,并移入100ml容量瓶内,再以12mmol/L苯甲酸溶液加至100ml。(5mmol/L),加12mmol/L苯甲酸溶液至刻度。【操作】取3支试管,编号,按下表操作。表3-12血糖测定操作步骤加入物(ml)空白管标准管测定管血清------,置37℃水浴中保温15分钟,在波长505nm处比色,以空白管调零,读取标准管及测定管吸光度。【计算】测定管吸光度血糖(mmol/L)=×5 标准管吸光度【注意事项】,应将标本用生理盐水稀释后再测定,结果乘以稀释倍数。,应弃之重配。因标本和标准用量少,其