医学微生物 实验课件---t08.ppt

文档介绍：实验八棒状杆菌与分枝杆菌
示教
结核分枝杆菌:抗酸染色法,液体、固体培养
麻风分枝杆菌:抗酸染色
白喉棒状杆菌: Albert染色法、革兰染色法吕氏血清斜面、亚碲酸盐平板
操作
病人痰液(结核分枝杆菌)抗酸染色法
白喉棒状杆菌 Albert染色法
结核分枝杆菌()
形态:
细长,略弯曲的杆菌,多聚集成团。无鞭毛,芽胞。
染色性:
不易着色,齐尼抗酸染色阳性。菌体呈红色,背景中其他物质蓝色。
培养特性:
专性需氧,最适37℃,营养要求高,生长缓慢,18h分裂一代。罗氏(Lowenstein-Jensen)培养基含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐、孔雀绿,2~6周可见菌落生长,菜花、颗粒或结节状菌落,乳白色或黄色,不透明。在液体培养基,生长于表面,有皱褶。
抗酸染色法(acid-fast stain) :以5%石炭酸复红染色,再用3%盐酸酒精脱色,然后用美蓝复染,则分枝杆菌呈红色(+),其他细菌和背景物质为蓝色(-)。
实验过程:取痰液→涂片(略厚)→干燥→固定→石炭酸复红染色8~10分钟后→用3%的盐酸酒精脱色约1~2分钟,脱色时轻摇玻片,直到涂片颜色脱去为止→水洗后,用碱性美蓝复染1分钟→水洗,印干→镜检
抗酸染色法
Albert染色法
制片同革兰染色,
甲液染5分钟→水洗→再以乙液(碘液)染1分钟→水洗→印干→油镜检
白喉棒状杆菌()
革兰染色:G +,菌体细长微弯,一端或两端膨大呈棒状,排列成V或L形(分裂时末端相连)。
Albert染色:见异染颗粒,菌体蓝绿色,异染颗粒蓝黑色(用于鉴定)
白喉棒状杆菌培养特性
吕氏血清斜面培养物:含凝固的血清,生长迅速。细小、灰白色、湿润、圆形突起的菌落。
亚碲酸钾血平板:黑色菌落。
亚碲酸盐碲(黑色)
还原
Elek平板试验结果(白喉毒素鉴定)
Elek Test
沉淀线(阳性)
含白喉抗毒素滤纸片
白喉杆菌菌苔
麻风分枝杆菌(M. leprae)
病人鼻粘膜分泌物标本经胞内抗酸染色,可见麻风分枝杆菌存在于细胞中,细胞胞浆呈泡沫状。菌体细长,略带弯曲,常呈束状排列。治疗后,菌体可呈短杆菌、颗粒状等。
形态染色