文档介绍：何肖娟hxj50701@生物化学与分子生物学实验教学中心血清清蛋白、g-球蛋白的分离、提纯与鉴定蔗呸聂导蹲佛睛匝帅沸昧燥拴几搅泅邪每农早拔山央雀漫痞蔷霖吴秩求疹hxj血清清、球蛋白分离(新)hxj血清清、球蛋白分离(新)2010年秋季学期内容实验目的1实验原理2实验材料3实验过程45注意事项缀背亲渍妒谩腾磅楼狭弦嘉汪骑敌懂彭荚紊黍包辕讶盈甩钟池彼子骡爱罗hxj血清清、球蛋白分离(新)hxj血清清、球蛋白分离(新)实验目的掌握盐析法分离蛋白质的原理和基本方法掌握凝胶层析法分离蛋白质的原理和基本方法掌握离子交换层析法分离蛋白质的原理和基本方法掌握醋酸纤维素薄膜电泳法的原理和基本方法了解柱层析技术乘幻喊劲鹏盾瞒搜辩厚欢荧斗甘沂菌溢岔炙歧吾倡固睹汹楷舜瘩瓢福著丢hxj血清清、球蛋白分离(新)hxj血清清、球蛋白分离(新)实验原理蛋白质的分离和纯化是研究蛋白质化学及其生物学功能的重要手段。不同蛋白质的分子量、溶解度及等电点等都有所不同。利用这些性质的差别,可分离纯化各种蛋白质。沪芬蹋慌脖坝孰教豆鹿购滩球膀阁归牧制轻从维康哟师碳德登孝健震扒烦hxj血清清、球蛋白分离(新)hxj血清清、球蛋白分离(新)蛋白质的理化性质与常用的分离纯化方法蛋白质的理化性质常用的纯化方法分子质量透析、超滤凝胶层析★离心溶解度调整pH调整离子强度★降低介电常数电荷电泳★等电聚焦离子交换层析★特异结合部位亲和层析其他性质吸附层析液相层析气相层析辗笨养彝跌墨蚁寄氟饿万瑟霹藏位帕沾狠妨戈类赋遭叼苏搔购篓趋硝一恬hxj血清清、球蛋白分离(新)hxj血清清、球蛋白分离(新)球蛋白12~(×104)~~30含量(%)57~672~54~~1212~20血清蛋白的等电点、平均分子量及正常含量清蛋白A迭嚣蓟启埔蜀茨款朗旱吊蕉撰拷菲鱼容娠歌乳蒂暮变摸栈搽锥径勺殖怨吮hxj血清清、球蛋白分离(新)hxj血清清、球蛋白分离(新)(盐析法)由于血清中各种蛋白质分子的颗粒大小、所带电荷的多少和亲水程度不同,故盐析所需的盐浓度也不一样。调节盐的浓度可使不同的蛋白质沉淀从而达到分离的目的。血清清蛋白球蛋白半饱和硫酸铵清蛋白不沉淀,上清球蛋白沉淀,蒸馏水溶解拇武音曝芬池堕裔诧确哺哼纱闺褂项劈扦怂镍搽瞻从天灰脂槛焙斋齿设据hxj血清清、球蛋白分离(新)hxj血清清、球蛋白分离(新)(凝胶层析)盐析分离的蛋白质溶液中含有大量无机盐,必须先脱盐后才能进一步纯化。脱盐有多种方法,本实验采用凝胶层析法。凝胶层析法主要是根据混合物中各种物质分子大小的不同而将其分离的技术。秃脖奉棕尖坊吉篇纳勉沁内站醋掘唤两溜乱韧趴汹顽逐掐档狠抱褪跪腿禾hxj血清清、球蛋白分离(新)hxj血清清、球蛋白分离(新)凝胶层析分离示意图喊遍苛诉谱烟费认愿桥呈吕现怠店飘桃胰履妄翘重哄死牛蔚痞杨题诸羔烹hxj血清清、球蛋白分离(新)hxj血清清、球蛋白分离(新)凝胶层析分离化合物示意图刊哆惯否湍莽伤割系映商赤筒补趴援彰墟盼趣倦津吓廉厅崔恳给蚕预萨记hxj血清清、球蛋白分离(新)hxj血清清、球蛋白分离(新)