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柠条锦鸡儿香豆酸-3-羟化酶(C3H)基因克隆及其功能初步研究.doc

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柠条锦鸡儿香豆酸-3-羟化酶(C3H)基因克隆及其功能初步研究.doc

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柠条锦鸡儿香豆酸-3-羟化酶(C3H)基因克
隆及其功能初步研究#
李高1,3,杨杞1,张烨2,王瑞刚1,李国婧1**
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10
15
20
25
30
35
(1. 内蒙古农业大学生命科学学院,呼和浩特 010018;
2. 鄂尔多斯市食品药品检验研究中心,鄂尔多斯 017000;
3. 北京市颐和园管理处,北京 100091)
摘要:香豆酸-3-羟化酶(Coumarate 3-Hydroxylase, C3H) 是木质素生物合成途径中的关键酶
之一,本研究以柠条锦鸡儿为材料,利用 RACE 技术克隆了 C3H 基因。对柠条锦鸡儿 C3H
基因的 gDNA 和 cDNA 全长分析显示该基因具有三个外显子,两个内含子,编码框长度为
1530bp,编码 509 个氨基酸。预测该基因编码蛋白的等电点位 ,分子量约 。氨
基酸序列分析显示具有一个保守的 P450 结构域。系统进化分析表明该蛋白与大豆 C3H 具有
最高的同源性,将该基因命名为 CkC3H,GeneBank 登录号为 HQ829858。构建 35s 驱动的
CkC3H 基因植物表达载体,互补拟南芥 C3H 基因突变体,转基因植物表型得以部分恢复。
这些结果说明柠条锦鸡儿 CkC3H 可能与拟南芥 C3H 具有相同的功能。
关键词:C3H;木质素;序列分析;ref8
中图分类号:Q94
Cloning and Sequence Analysis of the CkC3H Gene from
Caragana korshinskii Kom. and Preliminary Studies of Its
Function
LI Gao1,3, YANG Qi1, ZHANG Ye2, WANG Ruigang1, LI Guojing1
(1. College of Life Sciences, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018;
2. The Ordos Food and Drug Inspection and Research Center, Ordos 017000;
3. Beijing Summer Palace Management Office, Beijing 100091)
Abstract: Coumarate 3-Hydroxylase (C3H) is a key enzyme in lignin biosynthesis pathway. In
this study, a C3H encoding gene was cloned by rapid amplification of cDNA end technique from
Caragana korshinskii Kom.. The full length gDNA of CkC3H was 4235bp, contained three exons
and two introns. The full length of ORF was 1530bp, and the protein deduced from this cDNA
comprise