基因敲除.ppt

文档介绍：基因敲除2007年诺贝尔生理学医学奖基因敲除2007诺贝尔生理学医学奖获得者英国人马丁·埃文斯、美国人马里奥·卡佩基和奥利弗·史密斯(从左至右),因为他们在改造活体内特定基因的“基因靶向”技术等方面做出的奠基性贡献,而共同获此殊荣。主要内容一、基因敲除概述二、基因敲除原理和方法三、,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较成功的有基因的插入突变和iRNA,它们同样可以达到基因敲除的目的。 。。。除上述几种已经比较成熟并且普遍使用了的基因敲除原理外,还有一些基于其他原理的敲除技术正处于研究和完善过程中,如TFOs(Triple helix forming oligonucleotides)引导的基因敲除术[16]以及反义技术在基因敲除技术中的运用等。. 利用基因同源重组进行基因敲除?? 细胞的获得??4. 选择筛选已击中的细胞??. . 2条件性基因敲除法?定义:将某个基因的修饰限制于小鼠某些特定类型的细胞或发育的某一特定阶段的一种特殊的基因敲除方法。?它实际上是在常规的基因敲除的基础上,利用重组酶Cre介导的位点特异性重组技术,在对小鼠基因修饰的时空范围上设置一个可调控的“按钮”,从而使对小鼠基因组的修饰的范围和时间处于一种可控状态。利用Cre/LoxP实现靶基因的切除