文档介绍:ULBP4原核表达、生物学功能鉴定及其单克隆抗体的制备和初步鉴定(一)    作者:曹伟,郝志勇郗雪艳孔燕马驰崔莲仙何维【关键词】ULBP4;,NKG2D;,IFN ExpressionandbiologicalfunctionofULBP4inRosettagamiTMB(DE3)andmAbpreparation [Abstract]AIM:ToexpresshumanULBP4inRosettagamiTMB(DE3):DNAfragmentsofULBP4werederivedfromHO8910RNAbyreversetranscriptasepolymerasechainreaction(RTPCR).Thefragmentsencodingtheformer225aminoacidsofULBP4wereclonedintoHistagfusionproteinexpressionvectorpET22b(+).TheCHistagfusionULBP4(225a)ordingtomanufactory’’:,:,. [Keywords]ULBP4;NKG2D;IFNγ;RosettagamiTMB(DE3);Expression;Biologicalfunction;monoclonalantibody 〔摘要〕目的:在大肠杆菌中表达ULBP4重组蛋白,并制备其特异性的单克隆抗体(mAb),为γδT细胞对ULBP4的识别机制研究奠定基础。方法:根据GenBank中ULBP4的基因序列设计相应的引物,用RTPCR方法从HO8910细胞中扩增得到ULBP4片段,构建重组原核表达质粒pET22b(+)/ULBP4(前225aa胞外段),在RosettagamiTMB(DE3)大肠杆菌中获得表达且主要位于包含体中,经纯化透析复性后,分析其对NK细胞IFNγ细胞因子