文档介绍：蛋白质的变性、凝固及沉淀实验一生物化学与分子生物学教研室实验目的能够说出蛋白质变性、凝固反应的原理及实验方法能够说出蛋白质沉淀反应的原理及实验方法能够运用盐析法及重金属沉淀法主要实验内容蛋白质的加热变性凝固蛋白质沉淀反应蛋白质盐析重金属盐沉淀蛋白质生物碱试剂沉淀蛋白质蛋白质的变性(denaturation)在某些理化因素的作用下,蛋白质严格的空间结构被破坏(不包括肽键的断裂),从而引起若干理化性质和生物学性质改变的现象。变性后的蛋白质称变性蛋白,能使蛋白质变性的物质叫蛋白质变性剂。变性因素物理因素高温、高压紫外线、X射线、电离辐射和超声波等化学因素强酸、强碱有机溶剂、重金属盐高浓度尿素、盐酸胍等变性实质:破坏了空间结构,一级结构不受影响(分子组成、分子量不变)。变性的可逆性可逆变性:除去变性因素,蛋白质空间结构可以恢复原状。不可逆变性:除去变性因素,蛋白质空间结构不能恢复原状。消灭病原微生物蛋白质制剂的保存保护体内蛋白质蛋白质分子颗粒大小1-100nm之间,属胶体颗粒范围,在溶液中能形成稳定的胶体。原因蛋白质的胶体性质及沉淀:表面形成水化层表面同种电荷的斥力除去这两个因素,就会发生沉淀。蛋白质分子相互聚集而从溶液中析出的现象称为沉淀。++++++++++++++++++++++++--------蛋白质胶体颗粒的沉淀带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质酸酸碱碱脱水脱水脱水不稳定的蛋白质颗粒(沉淀)带正电荷的蛋白质(疏水胶体)带负电荷的蛋白质(疏水胶体)碱酸(亲水胶体)(亲水胶体)(亲水胶体)--------结构和性质都不变适当条件下可重新溶解是分离和纯化的基本方法结构和性质都发生变化沉淀不再溶解于水蛋白质的沉淀蛋白质变性沉淀并凝聚成块状称为凝固。不可逆变性状态蛋白质的凝固