文档介绍：槐花米中芦丁的提取纯化与鉴定一、目的要求:掌握酸碱法提取黄酮昔类的原理及方法。掌握趁热过滤及重结晶等基体操作3・黄酮类成分乙醇纯化方法4O掌握黄酮类成分定性与定量鉴定方法。二、实验原理芦丁(Rutin)又称芸香昔(Rutioside)芦丁是黄酮类植物的一种成分,黄酮类植物成分是存在于植物界并具有以下基本结构的一类化合物:就黄色色素而言,它们的分子中都有一个酮式拨基又显黄色,所以称为黄酮。黄酮的中草药成分几乎都带有一个以上轻基,还可能有甲氧基、绘基、绘氧基等其它取代基,3、5、7、4\几个位置上有轻基或甲氧基的机会最多,6、8、V、2\等位置上有取代基的成分比较少见。由于黄酮类化合物结构中的疑基较多,大多数情况下是一元昔,也有二元昔。芦丁是黄酮昔,其结构如下:芦丁(Rutin) 黃则骨架芦丁的提取原理:芦丁于热水,难溶于冷水。其分子结构中具有较多的酚轻基,显弱酸性,在碱中易溶解,而在酸性条件下易析出沉淀。故可采用碱提酸沉法提取芦丁。2. 芦丁提取纯化原理芦丁中具有多个酚轻基,呈酸性,在酸液中电离受抑制溶解度降低,而在碱液中易成盐而增加水溶性,实验中利用芦丁的这种特性来实现提取和析晶的。,实验中釆用先以热乙醇溶解再冷却析出的方法进行精制。3・芦丁定性与定量鉴定原理取纯化后的芦丁2刃加乙醇15ml,置水浴上加热5分钟,滤过,取滤液lml,加浓盐酸1〜2滴,再加镁粉少许,即显樱红色。使用紫外分光光度计通过测溶液的吸光度求出对应的浓度。三实验仪器紫外分光光度计,水浴锅,研钵,冷凝回流管,天平,广泛PH试纸,布氏漏斗,量筒,烧杯,滴定管,吸量管等。四实验试剂槐花米,饱和石灰水,镁粉,酚猷,95%乙醇,盐酸,0・157mg/ml的芦丁标准液,五实验步骤称取3g槐花米于研钵中研成粉状,置于50mL烧杯中,加入30mL饱和石灰水溶液,加热至沸,并不断搅拌,煮沸一刻钟后,抽滤,滤渣再用20mL饱和石灰水溶液煮沸lOmin,合并滤液用15%盐酸中和,调节PH二3-4,放置1-2小时,使沉淀,抽滤,水洗,得芦丁粗产物。4. 将制得的芦丁粗品置于50ml烧杯中,加入30ml水,加热至沸,并不断搅拌,并慢慢加入10mL饱和石灰水溶液,调节PH二8-9,等沉淀溶解后,趁热过滤,滤液置于50mL烧杯中,用15%盐酸调PH=4-5,静置30min,芦丁以浅黄色结晶析出,抽滤,水洗,烘干得芦丁纯品操作流程:槐花米粉末煮沸提取,抽滤饱和石灰水中和、沉淀、抽滤》粗提物15%HC1 洗涤粗品煮沸、溶解饱和石灰水15%HC1溶液洗涤趁热过滤滤液5. 取所提取的芦丁粗品,加入无水乙醇约30倍,水浴热回流溶解,趁热抽滤,将滤液浓缩至原体积一半,转移至烧杯中,放置,冰浴,析出结晶,抽滤,称重,计算得率。6・黄酮类定性鉴定:1。盐酸-镁粉试验:取样品数毫克,加稀醇加热溶解,加镁粉50-100毫克,滴加浓盐酸,溶液由黄色渐变红色者表示有黄酮类化合物。