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蛋白质与表面活性剂相互作用的导数紫外光谱实验室光谱宁爱民①孟磊金显春赵士举宛新生实验部分引言第卷,第在研究表面活性剂与蛋白质相互作用的各种方法中,紫外光谱法因具有简单快速的优点而被广泛应用。但是,常规紫外光谱法口。只能从整体角度研究蛋白质中芳香族氨基酸残基微环境的变化,而导数紫外光谱法出叫梢约觳獠煌枷阕灏被岵谢⒒肪臣缘谋浠佣芯康鞍字实生物大分子构象的变化。在常见的两种导数紫外光谱中慕椎际贤夤馄妆榷椎际贤夤馄赘为灵敏乜D壳埃刮醇慕椎际贤夤馄追ㄔ诒砻婊钚约劣氲鞍字蚀蠓肿酉嗷プ饔弥杏τ玫谋道。本文利用该方法研究牛血清白蛋白胧榛蛩崮相互作用过程中芳香族氨基酸残基微环境极性的变化,从而推断瓜蟮谋浠仪器与试剂一型双光束紫外可见分光光度计本┢瘴鐾ㄓ靡瞧饔邢拊鹑喂。牛血清白蛋白锸约粒本┌虏┬巧锛际跤邢拊鹑喂,十二烷基硫酸钠治龃浚V市国药集团化学试剂有限公司J笛橛闷渌约辆7治龃俊J笛橛盟J⒀欠腥握袅笏实验方法首先配制离子强度,一·械腘。。一。缓冲溶液,并用计校正为H缓笥么嘶撼迦芤号渲埔幌盗泻.·獴,ǘ确直鹞,×—×卅的个猄混合溶液。笥糜谧贤夤馄撞舛ā月畂溶液配制摘要利用四阶导数紫外光谱法研究了在.,离子强度·的磷酸盐缓冲溶液中,浓度为甇。呐QG灏椎鞍与十二烷基硫酸钠嗷プ饔玫墓讨校枷阕灏基酸残基微环境极性的变化。通过研究发现,随着ǘ鹊牟欢显龃螅址枷阕灏被岵谢⒒肪臣性的变化趋势不同。从而可以判断隨相互作用过程中瓜蟮谋浠关键词导数紫外光谱;微环境;极性中图分类号:;.文献标识码:文章编号:———甆幽吓┮荡笱Ю硌г褐V菔信┮德.①联系入,电话:;猰簄瓹作者简介:宁爱民。男,。收稿日期:——;接受日期:—·
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由图梢钥闯觯贐—芤簊浓度分别为:猳;×一籪一;×一结果与讨论。一。;,×”。卜。越生的吸收Ⅲ,但不能区分谢谀埂薄薄薄附近为谢奶卣鞣濉6椎际贤庵痢光谱图校谙嘤Φ奈恢糜姓庑┖せ黰。保米贤饪杉止夤舛燃粕枭鲜雠渲频囊幌盗蠦—芤涸段内分辨率为的吸收光谱,并用募4媸荨H缓笸ü齇软件进行四阶蚨导数运算,并拟合为在两组原始数据之间有瞿诓逯档次样条函数,最后得到分辨率隨相互作用过程中二阶和四阶导数紫外光谱的比较在猄溶液中,某9孀贤夤馄自附近有一明显的吸收峰,反映了链中色氨酸胚峄泛屠野彼吸收谱带。而这些吸收谱带的变化能反映芳香族氨基酸残基微环境的变化āS捎诓导数紫外光谱能区分这些谱带,所以成为妻⋯““过程中,亩缀退慕椎际贤夤馄酸残基的负吸收峰嘲。通过对比这两种导两以,四阶导数紫外光谱在辨析各芳香族氨紫外光谱的测定在为乃慕或二阶际贤夤馄譡。苯环的丌一。跃迂在浇λ残基在和苯丙氨酸谢浇研究瓜蟊浠囊桓鲋匾5姆川’‘’图媸盨与嗷プ饔的对比图。中,乃慕椎际贤夤馄淄中有鎏卣鞯奈辗錥。其中,,浇狿残基的鎏卣鞣澹浇猅残基的特征峰,附近是疶的特征重叠峰,数紫外光谱图发现,四阶导数紫外光谱图Ⅲ,。中各特征峰均较明显,尤其是当ǘ小于×,时,二阶导数紫外光谱图中附近谢奶征峰几乎观察不到,而在四阶导数紫外光谱图中谢奶卣鞣寰苊飨浴K基酸残基绕涫荰残基卣鞣迨北⋯..波:痭图℃时,猄溶液中二阶退慕导数紫外光谱⋯⋯备鞣枷阕灏被岵谢卣魑辗宀ǔ!与ǘ戎涞墓叵第宁爱民等:。”浓度痬..
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