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蛋白提取率%喝娑纠诒始铰ɡ槔筝齿铩搿羣%响应面法优化牦牛肝蛋白提取工艺研究柳青海保盘莆,一,李天才中国科学院西北高原生物研究所,青海西宁;泄蒲г貉芯可海本牦牛粲谂继隳俊⑴?啤⑴Q强动物中的稀有种。主要分布在青藏高原和喜马拉雅山脉海拔~母吆厍苣土阆℃~℃的严寒,牦牛是世界上生活在海拔最高处的哺乳动物之二,我国的牦牛占世界总量%以上¨.笈8巫试捶岣唬壳俺舜车氖秤猛猓尚未进一步开发利用,利用效率较低。传统的藏民族医药中∞笈8渭捌浣嵛镒魑R恢殖S靡┎使用已久,曾在药典中也出现过,主要用于治疗贫血、营养不良等症状,这些使用方法存在着不科学和不合理的地方。为进一步规范、合理的使用这一资源,本文对牦牛肝蛋白提取工艺进行研究。近年来对肝蛋白研究较多,主要集中于肝蛋白多肽的活性方面,对开发利用蛋白类药物有着十分重要意义。牧嫌敕椒实验材料鲜牦牛肝购于西宁市东川屠宰场。考马斯亮蓝、氢氧化钠、牛血清蛋白、浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾、硼酸、碳酸钠、盐酸、石油醚均为分析纯。仪器与设备绞肉机,凯氏定氮仪,电子天平,电热恒温干燥箱虾T窘搅破餍党,、索氏提取器、马福炉。。取少量的鲜牦牛肝烘干粉碎后过目筛,用于测蛋白和脂肪含量,ú捎米粕罩量法口鞍缀静捎梦⒘靠隙ǖ7ǚ治鼍蒍,索氏提取法测定脂肪【.笈8蔚鞍椎鹊绲悴舛ú称取罚‘庋趸,在」保温提取缓笤一的条件下离心玫鞍姿芤海攘苛咳份,每份,用叫的鹘趐滴#.、、、、,静置,“离心ド锨逡汉蟾稍锍浦兀馗匆淮危恋砹孔畲点所对应的即为牦牛肝蛋白等电点。.笈8蔚鞍滋崛」ひ粘迫∈柿吭嫌谌瓶中,加入一定比例、一定浓度氢氧化钠溶液,在一定的温度下,恒温提取一段时问后,以袄胄∩锨逡海胠节至等电点,在下离心沉淀用去离子水洗次,调值至中性,重新溶解沉淀,测定其体积。蛋白浓度测定采用考马斯亮兰法旧5鞍滋崛÷始扑愎饺下:.笈8蔚鞍滋崛〉牡ヒ蛩厥匝橐圆煌囊料比篻为、、⒓:对牦牛肝中主要营养成分进行测定,然后用单因素和响应面分析法确定牦牛肝蛋白的最佳提取工艺。通过单因素试验选取影响因素与水平,在此基础上采用四因素三水平的响应面分析法,根据回归分析确定最佳提取工艺。试验结果表明:鲜牦牛肝水分含量为.%、灰分含量为%、蛋白含量为.%、粗脂肪含量为ィ蛔罴烟崛」ひ瘴#阂毫媳篻、碱液浓度~、提取时间⑻崛∥露妫捎酶锰跫鞍滋崛÷士纱ァ关键词:牦牛;肝蛋白;沼呕幌煊γ娣治中图分类号:文献标识码:文章编号:—【氨基酸和生物资源,收稿日期:——作者简介:柳青海,男,硕士研究生,研究方向:药用植物化学,:青海省科技厅项目。//
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·、提取时间、、提取温度为单因素,考察各因素对牦牛肝蛋白提取率的影响。.笈8蔚鞍滋崛」ひ盏纳杓剖匝樵诘ヒ蛩试验的基础上,运用—软件程序,根据狟中心组合实验设计原理一,采用四因素三水平的响应面分析法,以蛋白提取率为响应值,通过响应曲面分析对提取条件进行优化。峁敕治牦牛肝中主要营养成分测定结果由测定结果知,新鲜牦牛肝含水量约为.%、灰分为%、⒅竞为ィ杉笈8问且恢指叩鞍椎椭臼澄铩牦牛肝蛋白等电点测定结果如下图赏伎芍j笈8蔚鞍椎鹊点约为左右。单因