文档介绍：菠菜色素的提取和色素分离菠菜色素的提取和色素分离姓名:于晓庆学号:成绩:菠菜色素的提取和色素分离摘要:利用石油醚,甲醇为萃取剂萃取叶片中的叶绿素,在薄层层析中时分别在两种不同的展开剂中展开比较展开剂的极性,在柱层析中选用适当的洗脱剂进行层析,当第一个有色成分即将滴出时,取一锥形瓶收集的橙黄色溶液即胡萝卜素,用紫外分光光度计对其进行紫外光谱的测定关键词:菠菜色素萃取薄层层析柱层析引言:绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg),其差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂。植物中叶绿素a的含量通常是b的3倍。尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。胡萝卜素(C40H56)是具有长链结构的共轭多烯。它有三种异构体,即a-,β-和γ-胡萝卜素,其中β-异构体含量最多,也最重要。在生物体内,β-体受酶催化氧化即形成维生素A。当前β-胡萝卜素已可进行工业生产,可作为维生素A使用,也可作为食品工业中的色素。叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物,它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。与胡萝卜素相比,叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。叶绿素a(R=CH3)叶绿素b(R=CHO)β-胡萝卜素(R=H)叶黄素(R=OH)维生素A本实验从菠菜中提取上述几各色素,并通过薄层层析和柱层析进行分离。实验部分、仪器设备及试剂材料:新鲜菠菜叶片。仪器设备:电子天平();研钵;布氏漏斗.;圆底烧瓶;电热煲;滴管;显微载玻片;广口瓶;滤纸;少量脱脂棉;层析柱试剂:95%乙醇,丙酮,硅胶G,中性氧化铝,甲醇,石油醚(60-90℃),丙酮,(或冷冻)的菠菜叶,用剪刀剪碎并与20mL甲醇拌匀,在研钵中研磨约5min然后用布氏漏斗抽滤菠菜汁,弃去滤渣。将菠菜汁放回研钵,每次用10mL3:2(体积比)的石油醚-甲醇混合液萃取两次,每次需加以研磨并且抽滤。合并深绿色萃取液,转入分液漏斗,每次用10mL水洗涤两次,以除去萃取液中的甲醇。洗涤时要轻轻旋荡,以防止产生乳化。弃去水-甲醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥后滤入圆底烧瓶,在水浴上蒸去大部分石油醚至体积约为1mL为止。.薄层层析取四块显微载玻片,%羧甲基纤维素调制后制板,晾干后在110℃活化1h。展开剂:(a)石油醚-丙酮=8:2(体积比)(b)石油醚-乙酸乙酯=6:4(体积比)取活化后的层析板,点样后,小心放入预先加入选定展开剂的广口瓶内,盖好瓶盖。待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,在空气中晾干,用铅笔做出标记。分别用展开剂a和b展开,比较不同展开剂系统的展开效果。观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小次序。注意更换展开剂时,须干燥层析瓶。不允许前一种展开剂进入后一系统1..柱层析在20x10cm层析柱中,加15cm高的石油醚。另取少量脱脂棉,先在小烧杯用石油醚浸湿,挤压以驱除气泡,然后放在层析柱底部,轻轻压紧,塞住底部。将20g层析用的中性氧化铝(150~160目),从玻璃漏斗中