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片仔癀与多西他赛联合应用对舌鳞癌细胞的增殖及凋亡的影响.pdf

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片仔癀与多西他赛联合应用对舌鳞癌细胞的增殖及凋亡的影响.pdf

上传人:w3332654 2016/2/9 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。^论文作者签名:止瞪日期:堡!兰:至:≯中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外),以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名:垂始指导教师签名:至!磕簦日目录一、摘要中文论著摘要?????????????????..1英文论著摘要?????????????????..4二、英文缩略语??????????????????8三、论文部分前言????????????????????.9日U舌????????????????????.9材料和方法??????????????????10结果????????????????????13讨论????????????????????19结论????????????????????22四、本研究创新性的自我评价?????????????..23五、参考文献??????????????????.24六、附件综述????????????????????27致谢????????????????????41个人简介??????????????????..42·中文论著摘要·片仔癀与多西他赛联合应用对舌鳞癌细胞的增殖及凋亡的影响目的舌鳞状细胞癌(tonguesquamouscellcarcinoma,)是目前最常见的口腔颌面部恶性肿瘤,约占80%以上。目前舌鳞癌的治疗,是以手术治疗为主,辅以化学药物治疗的综合疗法,其五年的生存率低于10%。由于舌鳞癌解剖部位的特殊性,手术治疗会造成患者头面部外貌的损伤,导致患者的发音、吞咽、进食等功能的障碍,使病患的心理及日常生活受到很大的影响。传统化学药物治疗的毒副作用大,且价格昂贵,因而寻找治疗效果良好、毒副作用小且价格合理的抗肿瘤药物,成为目前舌鳞癌临床治疗的热点。片仔癀(PienTzeHuang,PZH)是中国著名的传统名贵中成药,由三七、麝香、牛黄、蛇胆等构成,具有清热解毒、消肿止痛、活血化瘀等功效。片仔癀是一种有效的抗肿瘤药物,实验研究表明片仔癀对肝癌、结肠癌、骨肉瘤、胃癌及宫颈癌等恶性肿瘤的增殖有一定的抑制作用。目前还未见关于片仔癀对舌鳞癌的相关作用的报道。多西他赛(docetaxel,DOC)是广谱抗癌药物,是以微管蛋白为靶点,使细胞周期于G2胱期发生阻滞,以致有丝分裂受阻,从而诱导细胞凋亡或死亡。多西他赛对头颈部癌、乳腺癌、肺癌、胃癌等恶性肿瘤皆有良好的治疗效果。临床应用多西他赛往往引起一系列较严重的不良反应。因此,寻找一种低毒性抗癌药物与多西他赛联合应用,既能减少多西他赛的用药剂量而发挥协同抗癌作用,又能降低该药物的毒副作用。本实验旨在探讨片仔癀单独或联合多西他赛对舌鳞癌细胞Tea83细胞生长、凋亡、细胞周期等方面的影响,并进一步研究其作用机理。方法1、MTT法检测片仔癀单独或与多西他赛联合应用后,对舌鳞癌Tca8113细胞的增殖抑制作用。2、用倒置显微镜观察片仔癀单独或与多西他赛联合应用后,对舌鳞癌Tea8113细胞外部形态的影响。3、片仔癀单独或与多西他赛联合应用48小时后,用Hoechst33258染色后荧光显微镜观察对舌鳞癌Tca8113细胞核形态的改变。4、流式细胞仪PI单染实验检测片仔癀单独或与多西他赛联合应用后,对舌鳞癌Tca8113细胞周期分布的影响。5、片仔癀单独或与多西他赛联合应用48小时后,流式细胞仪AnnexinV/PI双染实验检测舌鳞癌Tca8113的凋亡比例。6、Westernblot实验检测应用片仔癀单独或与多西他赛联合应用后,、、p53蛋白表达的影响。结果1、MTT法实验结果显示片仔癀对舌鳞癌Tca8113细胞增殖有明显的抑制作用,且具有时间依赖性和剂量依赖性。各剂量组之间、);片仔癀与多西他赛联合应用后,联合应用组的抑制率明显上升,且与片仔癀组、多西他赛组两两比较,差异有统计学意义(p<0.