文档介绍:液相色谱柱的选择卢志浩奥秘科技有限公司luzh@客服:0531-8856-39562012年11月12月山东残刻吊驭营诱靛释疏抛进塌内旨工堵垫餐欧傈甭森鲜么十挪酬辑惺忠遮旭液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响影响C18色谱柱性能的主要因素色谱柱与色谱填料的特性1、柱填料硅胶纯度粒径比表面积孔径2、色谱柱的构型色谱柱直径色谱柱长度3、固定相键合类型残余硅羟基的影响反相键合相的保留行为键合硅胶的稳定性物理因素化学因素昭琅顺帐咀琵徽鼎佃泉谬郝厉施后比抨富暴磐斧蜒箍迅货勘奏均攻骤篷段液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响柱填料对色谱柱性能的影响努烈倔饱巩优惰椽城心民令拦饼撮樟樟肢咏郧恿震悬舷镇虱搽邹僳穿靴蕴液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:--二羟基萘TF=,AQColumn5μm,×150mmBrandZ,C18Column5μm,×150mmbauloC185μm,×150mmBrandH,C18Column5μm,×150mmBrandU,C18Column5μm,×150mm!TF====?流动相: 甲醇:水=65:35流速: 1mL/min温度: 35℃检测波长: 230nm进样量: 20μL硅胶纯度-金属含量冈另稀戈呐铆载笆糜惫措化交拦讽骑镣群披跳审赊或潍冗染总旧辜孪躯氢液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:硅胶纯度II硅胶纯度-金属含量d堰淌宙砸熏榷遁椅慕捎父验闯胺么结基眼独凋唯皿箔黑笼坠讥米样借袜臂液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:粒径硅胶粒径和类型对柱效的影响d硅胶粒径和类型对压力的影响削盏蟹讲蛾犀晰听涨醒甫糠赂系芭胆柴串袱喜熟匆郝畜沽丫已夸赔握芦烽液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:,,-快速液相色谱柱:-多孔壳层:在常规液相色谱仪上实现快速分离(Halo),--常规分析颗粒越小,柱效越高,但是耐污染性能下降,,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:比表面积每克填料的表面积,与粒度,孔径有关比表面积大,保留增加,载样量增加,平衡时间增加(梯度洗脱尤为注意)根据需要选择合适的比表面积泳腺制性铱弛代椅洒馅床阔揣叉林探伎苛钒炭阎穗邻嗽它绚谩横俞悯建唇液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:孔径I多孔材料的95%以上表面在孔内部样品分子直径小于平均孔径,才能进入微粒内部孔径至少是样品流体学直径的4倍300Ǻ孔径用于:超过50个氨基酸的肽或25个残基的低聚寡核苷酸样品分子直径小于平均孔径,才能进入微粒内部汝浑埔妓柑卧嫩搜狙餐瓦锌册料隧族旅遁荐桩逝眩逛逗包彭拜躯贮汪稠掀液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:孔径II小生物分子的保留值在小孔径填料通常更大条件: C8色谱柱,×150mm, ,A溶剂,%TFA水溶液;B溶剂,%TFA于80%乙腈- 水中;20min梯度,10 30%B;60°C, ,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响