文档介绍：中南大学
硕士学位论文
鼻咽癌裸鼠模型血清蛋白质组学的研究
姓名:吴丽莎
申请学位级别:硕士
专业:病理学与病理生理学
指导教师:姚开泰
20060501
,蛋中文摘要研究背景和目的鼻咽癌琋俏夜戏降厍喽愿叻⒌亩裥肿瘤,发病隐匿,症状不明显,致使其诊断较为困难,大量基础和临床研究表明⒉∈且桓龆嘁蛩兀嘟锥蔚墓蹋饕S隕《荆е掳┪镆约耙糯等因素有关。发生远处转移,治疗后易复发是其致死的主要原因。对于鼻咽癌的临床早期诊断,监控疾病发展过程,评估治疗效果,。蛋白质组学技术作为后基因组时代的一种高通量研究方法,近年来广泛应用于人类疾病,尤其是肿瘤方面的研究当中。蛋白质组学是:细胞或组织基因组所表达的全部蛋白质,是一门研究蛋白质结构,活性,翻译后修饰,白质组学通过整体研究的方法,对蛋白质的数量,活性,不同生理或病理条件下的改变情况进行研究,其研究成果可用于各种疾病的早期诊断,监测疾病过程,,通过生物质谱分析获取蛋白质的肽指纹图谱钪赵擞蒙镄畔⒀手段进行数据库匹配得到蛋白质的相关信息。血清蛋白质组学饕J窃擞玫鞍字首檠喙丶际醴⑾与各种疾病相关的血清蛋白,并对其发现的具有特殊意义的蛋白质进行特性,结构和功能的相关研究。血清蛋白质成分的种类,含量都会随着不同的生理,病理过程而发生相应的改变,这就使得某些特异性血清蛋白质有可能成为疾病临床诊断的特异性标志。肿瘤实际上是细胞失去了对其生长的正常调控,导致克隆性异常增生而形成的新生物,这也意味着在肿瘤发生发展的过程中肿瘤细胞能自身分泌某些特定的蛋白质分子或者是过度表达某些蛋白质,这些。特殊”的蛋白分子被肿瘤细胞分泌释放,因此在肿瘤细胞分泌上清液中存在许多与肿瘤发生,发展相关的蛋白质分子,这些分子的存在即能直接刺激肿瘤细胞的生长维持其异型性的特点,又与肿瘤的侵袭转移这一生物学特性密切相关,作为一种分泌因子,它既可以影响肿硕士学位论文
瘤细胞本身的生长分化,也可以通过机体的循环系统改变整体的内环境,最终导致肿瘤的无限增殖和远处转移。从肿瘤细胞中释放入血的这些蛋白质,,本实验的目的在于,利用蛋白质组学技术,对赴嘌锨逡及闶竽P脱G褰醒芯浚罢矣隢相关的血清标志物。研究方法本实验运用蛋白质组学相关技术方法开展课题研究。擞孟赴呀獾姆椒ㄌ崛”茄拾┫ü匝不同裂解液成份,调整鹊憔劢共问纳柚茫冉喜煌琾段胶条实验结果,对鼻咽癌细胞株进行蛋白质组学研究。梦扪G迮嘌.,赴信嘌占琢鱿赴嘌锨逡海以%。加入适量裂解液结合超声粉碎,得到适用于闹琢鱿赴嘌锨宓鞍字恃罚邢嘤Φ鞍字首檠研究。占原位种植成功的闶竽P脱G寮岸哉兆橥炅洌别未致瘤裸鼠血清样本,采用不同分组类型的蛋白质样本进行混合的策略,在不同的范围的禾琾陆,,对血清计捉胁钜旆治觯钪战胁钜斓鞍字实闹势准ā研究结果本研究利用以建成的鼻咽癌裸鼠模型血清作为实验样本,结合鼻咽癌细胞株培养上清液蛋白质组学研究结果,探索鼻咽癌相关的血清蛋白质改变情况,为寻找喙氐难G灞曛疚锾峁┛赡艿南咚鳌本课题进行了如下工作:盟蚰旱缬炯际酰ü员茄拾┫,建立了分辨率高重复性好的计住—,鼻咽癌细胞培养上清液进行蛋白质组的研究,比较分析硕士学位论文中文摘要Ⅱ
两者蛋白质表达谱的差异:樘赜械个蛋白质差异点,┑牡鞍字实鹊绲阋约胺肿恿康男畔ⅲ鞍字适菘庵幸延械闹琢鱿赴嘌锨逡图谱作为参考,通过软件辅助和生物信息学手段,检索差异蛋白的相关数据,获取了差异蛋白质功能的初步信息,最终选取其中的龅憬兄势准ā质谱结果,特异表达的蛋白有:参与连环蛋白恢窒赴羌艿鞍祝謔,琘三种到獾腃匾毂泶锏腜,参与细胞内的氧化还原反应。⒘宋榷ㄐ越虾玫谋茄拾┞闶笱G宓鞍字方法,并比较了不同转移能力裸鼠血清与对照组裸鼠血清蛋白质计字涞牟钜欤ü煌琾围口禾醯闹馗词笛椋钪栈竦肗裸鼠血清蛋白质表达谱的差异:增加了龅鞍字实悖组增加了龅鞍字实恪@肕质谱技术对血清差异蛋白点进行鉴定,发现相较对照组裸鼠血清和檠G澹檠G逯芯哂忻飨缘谋泶锊钜臁结论本实验运用双向凝胶电泳姆椒ǎ直鸲员茄拾┫赴嘌锨逡海和鼻咽癌裸鼠模型血清蛋白质组进行研究。通过与对照组血清的比较,在鼻咽癌裸鼠模型血清中蛋白的表达具有显著性差异,为寻找鼻咽癌