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荧光共振能量转移①牛血清白蛋白与实光谱实验室陈志兵②查瑁刘信王克文陆佩佩引言实验部分第卷,第分析方法有高效液相色谱法∞、化学发光法啪、原子吸收法‘引、共振光散射法嘲、荧光法陬刀等。荧光共振能量转移技术因其比一般荧光法的重现性好、灵敏度较高,已经应用于。的测定‘。。本文研究牛血清白蛋白籚共振能量转移的条件及影响因素,以8澹琕为受体,利用共振能量转移技术建立了募觳夥椒ǎ猇杭觳庑路椒ǖ难芯刻峁┝饲捌诨陀ü/#籅标准溶液配制为畂×叫疞。籚虾国药化学试剂有限公司J约辆7治龃俊J笛橛盟6问⒀—撼迦芤簅..疞的曜既芤簅.⒁欢康腣标准溶液,用水定容到,室温放置,用荧光分光月‘维生素又名核黄素,是生物细胞必须的生物氧化还原辅酶,由于其暴露在光照下易降解,所以建立一种快速简便的。测定方法具有十分重要的意义。目前:的主要础。试剂与仪器司实验方法摘以发射波长呐QG灏椎鞍为给体,维生素:J芴澹芯苛嗽—撼逄逑抵蠦与涞挠ü夤舱衲芰孔R啤J笛榻峁砻鳎趐腡瓾缓冲体系中,.。受体发生有效的共振能量转移。关键词牛血清白蛋白;维生素海挥ü夤舱衲芰孔R中图分类号:.文献标识码;文章编号:】阯拗菅г夯в肷蒲аг安徽省宿州市汴河路号要①国家自然科学基金项目不帐〗逃氐阆钅宿州学院科研平台开放课题退拗学院国家级大学生创新创业训练计划项目资助②联系人,手机;;:.作者简介:陈志兵。男,安徽省寿县人,,:——;接受日期:·—
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结果与讨论蠢影响穹直鸨硎臼芴搴透宓挠ü馇慷。试疞时,易畲蟆R虼耍∮。若以该体系中/刚对加入的:的浓度作图,在一定范围内将得到线性函数,在最佳条件下,杏隫的浓度之间存在良好的线性关系,线性回归方程为/.光度计扫描荧光光谱牛血清白蛋白与维生紊旱挠ü夤舱衲芰孔R由文献芍猇旱募し⒐馄自一—礁霾ǘ危珺的发射光谱在杉鸅的发射峰与:的激发光谱有较好的重叠。这样就为蚔之间发生有效激发光去激发蚔的混合体系,Φ挠ü馇慷认陆担鳹的荧光强度增强,这充分说明了在这两种物质间确实发生了有效的荧光共振能量转移。:。。缓冲溶液及其浓度对/验结果表明.,缓冲溶液浓度为畂×腡狧作为缓冲体系。以牟ǔぜしⅲ潭˙和。的浓度分别为畂×疞和×疞,考察不同反应时间对体系的影响,试验结果表明,当反应时间为时/最大,因此本实验选用的反应时间为。固定。的浓度为畂×疞,研究了当呐ǘ却觨./鸾ピ龃蟮畂×疞时,体系的荧光光谱。试验结果表明,当ǘ戎鸾ピ龃笫保琕旱挠ü强度逐渐增强,进一步说明隫褐淙肥捣⑸斯舱衲芰ψR疲坏盉浓度大于畂×疞时,继续增大ǘ榷訴旱挠ü庠銮棵挥忻飨缘男ЧR蚨疚难≡馚的浓度固定呐ǘ任./芯苛说盫5呐ǘ却./ü夤馄住J匝榻峁砻鳎盫号ǘ戎鸾ピ龃笫保珺的荧光强度逐渐降低,:的荧光强度逐渐增强,也就是说,随着ǘ鹊脑龃螅搴褪芴寮涞哪芰孔羖衜/.,线性范围为×~一×疞,相关系数的能量转移提供了前提条件。由图芍#.从橹始捌鋚挠跋疞和×疞,×一/受体ǘ缺浠訤挠跋从而可以用于测定ǘ取波长痭图】猇河ü