文档介绍：中国兽医学报年月第卷第期. . .
副猪嗜血杆菌和猪链球菌双重方法的建立与应用
贾爱卿,李春玲,王贵平,杨冬霞,何丽丽,王金生广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生
实验室,广东广州
摘要:针对副猪嗜血杆菌和猪链球菌序列各设计对特异性引物,分别能扩增出和的
片段,并据此建立了快速准确鉴别副猪嗜血杆菌和猪链球菌的双重方法,床试验证明该方法具有很
好的特异性、敏感性,能对临床病料进行鉴别诊断。对份临床样本检测结果显示,副猪嗜血杆菌的检出率为
. ,猪链球菌的检出率为. ,二者混合感染率为. 。
关键词:猪链球菌;副猪嗜血杆菌;
中圈分类号:.;. 文献标识码: 文章编号:—
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副猪嗜血杆菌, 有品系的猪均可感染,发病无明显的季节性,全年都
所致疾病是近年来严重危害养猪业发展的新发细菌有发生,以~ 月发生较多,发病率从至
性传染病,导致猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜脑不等,死亡率通常在以上。
炎,主要危害~周龄的仔猪,发病率一般为临床上副猪嗜血杆菌和猪链球菌常呈混合感
~ ,死亡率可达以上。该菌曾被认为染’,且二者在临床症状和病理变化方面存在诸
是猪呼吸道的常在菌或条件性致病菌,而现在却在多相似的地方。因此临床上很难快速、准确地作出
健康猪群中呈暴发性流行,对养猪业的危害日益严判断,建立副猪嗜血杆菌和猪链球菌病的快速鉴别
重。诊断的分子生物学方法十分必要:
猪链球菌’,是一种重要序列保守性极高,是细菌分类鉴定
的人畜共患病病原,能导致仔猪脑膜脑炎、败血症、较为理想的靶序列。本试验根据副猪嗜血杆菌
关节炎、心内膜炎、肺炎和人的脑膜炎、败血症等,所和猪链球菌的序列各设计对特异性引
物,通过敏感性和特异性试验建立了可快速鉴别诊
收稿日期:—断副猪嗜血杆菌和猪链球菌的双重方法。
基金项目:广东省农业攻关资助项目一
年关键领域重点突破招标资助项目材料与方法
作者简介:贾爱卿,女,。
通讯作者. 菌株猪链球菌血清型、型、型和型为
中国兽医学报年月第卷第期.. .
本实验室保存;副猪嗜血杆菌血清型和型菌株关节液、脑、胸腔积液等直接接种于,℃振
由江苏省农业科学院馈赠;猪胸膜肺炎放线杆菌、多荡培养后,用所建立的反应体系进行检
杀性巴氏杆菌购自中国兽医药品监察所;大肠杆菌、测。同时将病料分别接种血平板和平板,过夜
猪霍乱沙门菌、金黄色葡萄球菌为本实验室保存。培养后挑取可疑菌落,同上进行检测。
. 引物及其序列副猪嗜血杆菌的引
物序列参照文献设计,预期扩增片段大小为结果
。:一一;: 一
. 副猪嗜血杆菌和猪链球菌的鉴别扩增
。用不同的模板组合进行扩增,结果显示以副猪
猪链球菌的引物序列参照文献
嗜血杆菌和猪链球菌为模板时,二者能同时扩增出
设计,预期扩增片段大小为。:
相应的特异性片段,而以各自为模板扩增时,只能扩
;:一
增出相应的特异性片段,且没有交叉反应,说明所设
一。以上引
计的引物能有效鉴别扩增副猪嗜血杆菌和猪