文档介绍：年月基础医学与临床
第卷第期. .
文章编号:———研究论文
高表达诱导凋亡后一及一的变化
申建刚,张晓岚,魏娟,霍晓霞,桑荣霞。,安君艳
.深圳市人民医院,广东深圳;.河北医科大学第二医院消化科,河北石家庄;
.石家庄市第一医院消化科,河北石家庄
摘要:目的探讨黏着斑激酶相关非激酶诱导肝星状细胞凋亡后基质金属蛋白酶及其抑制剂的
变化。方法在体外,以纤维连接蛋白刺激增殖,在脂质体介导下用表达质粒瞬时转染,应用
膜联蛋白/碘化丙啶双标记流式细胞术和透射电镜检测细胞的凋亡,检测、、—、
、蛋白表达。结果表达质粒成功转染,在翻译后水平抑制磷酸化。与空质粒组比
较,表达质粒转染,凋亡率由.% .%增加至.% ±.% .;同
时,在翻译水平上调表达、抑制表达。结论在脂质体介导下瞬时转染表达质粒可诱
导发生凋亡,/一比值上调可能参与了该调节过程。
关键词:肝星状细胞;凋亡;黏着斑激酶相关非激酶;基质金属蛋白酶。;基质金属蛋白酶组织抑制剂
中图分类号: 文献标志码:
/

—,. , ,.,—。
, .
.’,;.,
,;.,,,
:
一/一. ,
.—/
.
—,.,
, ,,—
,.
.—
.% 土.% .% ±.% ,..—
,,;
. /
.
收稿日期:——修回日期:——
基金项目:河北省自然科学基金;河北省卫生厅资助项目
通信作者:.
基础医学与临床.
:;;·;;

肝星状细胞,凋亡受质粒组。除对照组外,其余各组浓度均为
多种因素、多条信号传导通路调控。黏着斑激酶/。培养后收集细胞,用于检测细胞的
,在细胞内信号传导通路凋亡和各指标的蛋白水平。
中占有重要地位,处于整合素、
传导通路的交汇点。一末端含有黏着斑激酶采用阳离子脂质体介导的方法进行细胞转染,
相关非激酶.—,,作为根据提供的实验步骤操作。
的一种内源性抑制因子参与体内功能的. 检测、、
负向调节⋯。聊、和蛋白表达
基质金属蛋白酶, 消化、收集各组细胞,加入改良的裂解缓
是一类生物活性依赖于锌离子、有降解细胞冲液提取细胞胞质蛋白,取适量蛋白上样,以十
外间质,,转膜,封闭,兔
族,是其主要成员,是对、Ⅳ型胶原起降解抗多克隆抗体:、兔抗多
作用的明胶酶,主要降解基底膜中胶原。基质金属克隆抗体:、小鼠抗单克隆抗体
蛋白酶组织抑制剂.—:、小鼠抗单克隆抗体:和山
.,是其抑制因子,:作为第一抗体
过对、等金属活性蛋白酶的抑制促进反应,辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔
的形成。有研究表明,可调节的:、兔抗山羊:和山羊抗小鼠
表达。本研究探讨诱导凋亡后:作为第二抗体反应,曝光、显影、定影,
及蛋白表达的变化,以期为临床防治肝纤结果以目的蛋白与一肌动蛋白积分吸光度的比值
维化提供新的防治策略和理论依据。表示。
. 透射电镜观察细胞形态学
材料与方法
各处理因素干预后,消化、收集上述各组贴
. 主要试剂壁细胞,磷酸盐缓冲液漂洗,×离心,
表达质粒由细