文档介绍：中国协和医科大学
博士学位论文
胰腺癌进展与血管生成因子表达及调控的相关研究
姓名:闫长青
申请学位级别:博士
专业:外科
指导教师:赵玉沛
20070501
缩略词表缩略词英文全称中文全称碱基对活细胞计数试剂盒二氨基联苯胺二甲基亚砜脱氧核糖核酸溴化乙锭酶联免疫吸附实验异硫氰酸荧光素辣根过氧化物酶积分光密度千道尔顿碱性成纤维细胞生长因子互补脱氧核糖核酸脱氧核糖核苷三磷酸匪囊宜胎牛血清免疫球蛋白类胰岛素生长因子丝裂原活化蛋白激酶基质金属蛋白酶信使核糖核酸中国协和医科大学博士学位论文.
亍!薅硭籶辏侩铸光密度聚丙烯酰胺凝胶电泳磷酸盐缓冲液聚合酶链式反应碘化丙啶核糖核酸逆转录聚合酶链式反应十二烷基磺酸钠小干扰撼逡四甲基乙二胺三羟甲基氨基甲烷血小板反应素一血管内皮细胞生长因子中国协和医科大学博士学位论文圮
中文摘要抗肿瘤新生血管形成的研究已经发展成为目前抗肿瘤治疗当中最具潜力的一个第一部分胰腺癌病人外周血血管生成因子表达水平变化与疾病进展关系的研究背景及目的:胰腺癌恶性度高,发展快、发现晚、预后差,占恶性肿瘤死亡率中第唬平均生存时间为鲈拢年生存率不足ィ认侔┲瘟埔宰酆现瘟莆V鳎手术切除率低、放化疗耐受是胰腺癌治疗效果不满意的主要原因。寻找新的安全有效的治疗手段是亟待解决的问题。血管形成是肿瘤生长、侵袭及转移的基础,研究热点。抗血管形成治疗在抑制肿瘤生长进展的基础上结合放、化疗可能会获得理想的协同治疗效果。为了进一步探讨抗血管形成治疗在胰腺癌治疗中的作用,有必要对胰腺癌发生及进展过程中血管形成调控作用及机理进行深入了解。血管生成因子是调节肿瘤及正常机体血管形成最重要的因素,因此通过对胰腺癌进展过程中血管生成因子表达的研究可能为进一步了解胰腺癌发生及进展机制及提高胰腺癌诊断和综合治疗水平提供新的思路。肿瘤新生血管生成调控是肿瘤细胞和宿主相互作用的结果,血管生成因子主要来源于肿瘤细胞、宿主细胞及细胞外基质。血管生成因子不仅调节肿瘤新生血管形成,而且对肿瘤细胞增殖、侵袭等生物学特性产生影响,参与胰腺癌进展全过程,血管生成因子的表达与肿瘤的恶性程度、浸润转移及预后密切相关。人体内新生血管调控因子按其功能可以分为两类:促血管生成因子和抑血管生成因子。为了全面系统地了解血管生成因子在胰腺癌进展中的作用和意义,首先,我们拟通过检测胰腺癌病人外周血清中血管生成因子表达的变化,即血管生成因子在机体的综合表达情况,研究其在胰腺癌进展中的作用及临床意义;进一步,通过对多株胰腺癌细胞血管生成因子表达水平差异与胰腺癌细胞株的恶性生物学表现,如生长、增殖及侵袭进行对比研究,以期在细胞水平探讨血管生成因子与癌细胞恶性行为的关系,为评估抗血管形成治疗及提出治疗策略提供有力的理论和实验依据。具体工作分为两部分:研究:通过酶联免疫吸附实验检测胰腺癌病人、胰腺炎病人及正常人外周血血清中血管生成因子浓度,对照临床诊治中国协和医科大学博士学位论文
与嘶表达显著相关。显著相关,表达与雠磅賝醒1泶锵灾喙兀琫泶资料进行分析。结果显示:促/抑血管生成因子在胰腺癌病人外周血高中表达,胰腺癌病人中不能手术切除组较手术切除组、酉爸ヾ表达显著升高,⒘馨妥R啤⒀9芮址浮⒃洞ψR萍临床分期密切相关,与肿瘤分化及肿瘤大小密切相关,与血管侵犯密切相关,与肿瘤大小密切相关,賝与肿瘤大小及血管侵犯密切相关,与血管侵犯及远处转移密切相关。表达与黜表达第二部分胰腺癌细胞株血管生成因子表达水平与其细胞生物学特性的相关研究:,同时通过癇⑶骰∈曳ń幸认侔┫赴、琈,鷆及脑鲋臣扒窒约觳狻结果显示:在晗赴芯斜泶铮髦瓯泶锪看嬖谙灾钜欤郧窒最强的泶镒钋俊株细胞中均有表达,各组表达量亦存在显著差异,增殖及侵袭性较强的和械谋泶镆睬坑谄渌赴辍实验结果显示暌认侔┫赴昃轎泶铩株胰腺癌细胞表达差异显著,总体表达水平较低。暌认侔┫赴鷇泶锊钜煜灾谇窒性最强的斜泶镒钋浚渌赴瓴槐泶锘虮泶锪亢艿汀Q9苌梢蜃在同一胰腺癌细胞株存在共表达。胰腺癌细胞株胞外的及泶显著强于胞内表达,胞内表达显著强于胞外表达。通过技术干预胰腺癌细胞株、癙的和的表达,及骰∈曳ü鄄煲认侔┫赴鲋臣扒袭性变化。结果显示:抑制和表达,、絚及袭性减弱,增殖显著抑制,鲋城魇剖芤郑琍锄攵哉兆槲薏异;同时抑制及表达与单独抑制及表达相比较,在不同细胞株对增殖及侵袭性影响不尽相同。通过际醺稍ひ认侔┫赴阺及腣中国协和医科大学博士学位论文
的表达,及鄄煅9苌梢蜃覸癳表达变化。结果显示:通过芄幌灾种芕泶铮眘及暌认侔┫赴阞趍郊跋赴夥置谒奖泶均升高,及显著升高。通过芄幌灾种芺泶铮同时在、.癙在水平及细胞外分泌水平降低,癙趍浇档拖灾瑂癙在细胞