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抗果蝇MRJ蛋白单克隆抗体的制备和鉴定.pdf

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文档介绍

文档介绍::.1007-,刘丹,宋文,刘明,赵阳,唐超,吴秀山,王跃群+(湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南长沙410081)摘要:制备抗果蝇MRJ蛋白单克隆抗体可用于研究果蝇m巧的生物学功能,使用IPTG诱导重组质粒pET28a·md在大肠杆菌Rosetta中表达,重组蛋白经过Ni—IDA凝胶柱亲和纯化后免疫BALB/c小鼠。然后取免疫好的小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,经克隆和筛选获得了能分泌抗果蝇MRJ蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。腹水制备后获得单克隆抗体,通过ELISA和WesternBlot对所获得的抗体进行鉴定,结果表明所制备单克隆抗体能够特异性结合于原核及真核细胞表达的MRJ蛋白,可用于研究mrj基因的生物学功能。关键词:mrj;细胞融合;单克隆抗体中图分类号:Q511文献标识码:A文章编号:(2013)02-0154-05PreparationandIdentificationofAnti·DrosophilaMRJProteinMonoclonalAntibodyLIAOSifang,LIUDan,SONGWen,LIU心昭,ZHAOYang,TANGChao,形UXiushan,WANGYuequn木(TheCenterforHeartDevelopment,KeyLabofMOEforDevelopmentBiologyandProteinChemistry,HunanNormalUniversity,Changsha410081,Hunan,China)Abstract:Preparationofanti—·me"bi——IDAgelcolumnwasusedimmunizedBALB/—·—:m0;cellfusion;monoclonalantibodyM

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