文档介绍：单位代码 10475
学号 104753101455
分类号 R47
硕士学位论文
小鼠眼球发育及神经酰胺作用机制的研究
学科、专业: 护理学
研究方向: 围产期的眼科护理
申请学位类别: 医学硕士
申请人: 李雪
指导教师: 邓锦波教授
二〇一三年五月
THE STUDY OF EYE DEVELOPMENT IN MOUSE
AND MECHANISM OF CERAMIDE
A Dissertation Submitted to
the Graduate School of Henan University
in Partial Fulfillment of the Requirements
for the Degree of
Master of Medicine
By
Li Xue
Supervisor: Prof Deng Jinbo.
June, 2013
关于学位论文独创声明和学术诚信承诺
本人向河南大学提出硕士学位申请。本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导
师的指导下独立完成的,对所研究的课题有新的见解。据我所知,除文中特别加以说明、
标注和致谢的地方外,论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包括其
他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对
本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。
在此本人郑重承诺:所呈交的学位论文不存在舞弊作伪行为,文责自负。
学位申请人(学位论文作者)签名:
201 年月日
关于学位论文著作权使用授权书
本人经河南大学审核批准授予硕士学位。作为学位论文的作者,本人完全了解并同
意河南大学有关保留、使用学位论文的要求,即河南大学有权向国家图书馆、科研信息
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索、查阅。本人授权河南大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的,可
以采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制手段保存、汇编学位论文(纸质文本和电子文本)。
(涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书)
学位获得者(学位论文作者)签名:
201 年月日
学位论文指导教师签名:
201 年月日
摘要
脊柱类动物的眼因其功能是一个非常特殊的器官,因其特殊的结构和屈光系统一直
是神经发育学学科中的研究热点。眼睛是由几个胚层来源的不同部分,经过一系列的诱
导作用和时间,空间上的协调,所形成的一个具有精确功能的器官。眼的发育主要包括
角膜、晶状体及视网膜发育,发育过程与神经细胞的迁移、增殖、分化密切相关。本课
题选用 C57BL/6J 小鼠,对 E8 至 P180 年龄段的正常小鼠的角膜、晶状体及视网膜发育
过程中神经干细胞的增殖,神经细胞的分化,细胞的凋亡以及重要调控蛋白的表达进行
了系统的研究。另外,有研究表明,神经鞘磷脂合成酶 2 基因敲除(sphingomyelin synthase
-/-
2 knockout, SMS2 )会造成体内神经酰胺的堆积,神经酰胺的堆积是否会影响小鼠视网
-/-
膜神经细胞增殖与双极细胞的发育,有关这方面的研究较少。本课题选用 SMS2 小鼠,
应用免疫细胞化学及 BrdU 标记增殖细胞技术,对该问题进行研究,这将有助于我们深
入理解视网膜的发育及神经酰胺的作用机制。
目的:探讨角膜细胞的增殖与凋亡对角膜结构修复与塑形的作用;探讨晶状体细胞
增殖对晶状体发生的作用及其与细胞周期之间的关系,研究 Synaptophysin 蛋白在晶状
体发生过程中的作用;探讨视网膜细胞增殖与细胞周期之间的关系,以及视网膜神经细
胞分化和突触连接形成对感光信息传递的作用;探讨神经酰胺堆积对视网膜发育的影
响。
方法:本课题应用 HE 染色、免疫荧光和 BrdU 技术等技术对胚胎和出生后小鼠角
膜、晶状体、视网膜进行形态学观察,对视网膜 BrdU 和 CyclinD1 阳性细胞密度进行测
量。
结果:1. 小鼠角膜的发生与细胞凋亡
胚胎发育及出生后早期,角膜以实质层的发育为主。P14 左右,角膜上皮细胞层开
始增殖分化为两层细胞,同时内皮细胞也开始分化。至 P30 时,我们可以辨别出角膜的
六层结构。BrdU 阳性细胞主要存在实质层中成纤维细胞,出生以后也可见于角膜上皮
细胞层和内皮