文档介绍：水仙组织培养方案实验目的:了解植物组织培养的概念,认识植物组织培养的特点和类型;了解植物组织培养技术在现代经济发展中的应用。实验原理:植物组织培养的理论依据是植物细胞具有全能性,所谓细胞全能型是指植物体任何一个细胞都携带者一套能发育成完整植株的全部遗传信息。在立体培养的情况下,这些信息可以表达,产生出完整的植株。一些已经分化的细胞可以通过脱分化产生愈伤组织。该组织是一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团,经过进一步分化培养,则可生出完整的小植株。实验步骤:1、接种选取一年生或两年生鳞茎为材料,去掉干枯鳞叶与鳞茎盘,在相对无菌的条件下层剥鳞叶,再把鳞叶切掉4/5,仅留鳞叶基部及相连的部分鳞茎盘,最后纵切成长约2mm,宽约1mm的组织块直接接种于培养基上。每支试管接种两块,置培养箱培养。2、诱导愈伤组织用鳞叶基部作为外植体诱导愈伤组织,在上述MS培养基中加入1Omg/mL6-,两周后形成愈伤组织。我们通常配制1L的MS诱导愈伤培养基中加入30g蔗糖,12g琼脂,,加入800uL6-,分装20瓶,咼压灭园20min,冷却凝固后放置1・2天,无污染出现后即可使用。将组织块、愈伤诱导培养基、锡子和刀片、酒精瓶(泡银子)、大培养皿和废液瓶等全部放入超净台灭菌20min,开始进入超净台进行如下操作:(1)首先将组织块切至培养皿的滤纸中,将组织块四周的边缘全部切去以造成愈伤,将愈伤的组织块分别切成小片(大小3・5mm左右)。(2)然后将配制的诱导培养基中残余的水分倒掉,再分别用锡子将组织块接种至培养基中,注意要将叶背面和培养基充分接触,用鰻子轻扌恩一下,防止掉落,每瓶接6・8个左右。为了减少污染,建议每接两瓶更换一次滤纸,操作人员勿离开超净台,直至将组织块全部接至愈伤诱导培养基中。3、愈伤组织继代将诱导的愈伤组织继代两次,两周后进行取样。继代两次的主要原因是将愈伤组织中残留的鳞叶切除干净,继代两次后的愈伤组织完全不含有鳞叶且大小合适取样。配制1L的MS愈伤组织继代培养基中加入30g蔗糖,12g琼脂,800uL