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大鼠肾脏糖胺聚糖的种类及二糖组成分析皓,于广利。,赵峡,郝翠,李广生,王培培引言笛椴糠舯拦鶤公王第卷,第月光谱学与光谱分析摘要采用两步酶解和离子交换色谱从大鼠肾脏中提取糖胺聚糖,以醋酸纤维素薄膜电泳分析糖胺聚糖种类,以弱阴离子交换色谱分离各种糖胺聚糖。纯化后的糖胺聚糖分别经特定糖胺聚糖酶裂解,采用强阴离子交换高效液相色谱￡贤饧觳夥治銎涠亲槌伞=峁砻鳎琖笫蟆I鲈嗵前肪厶主要由硫酸乙酰肝素和少量硫酸皮肤素组成。硫酸乙酰肝素含有侄牵渲泻幸阴;—,%。关键词大鼠肾脏;精胺聚糖;种类;二糖组成中图分类号:.文献标识码:,广泛存在于细胞表面和细胞外基质中。作为生物体内重要的牛物大分子,糖胺聚糖通过与生物体内各种酶、生长因子及细胞黏附因子等结合,参与细胞增殖、分化和免疫调节等重要的生物学过程~。研究表明,在不同物种的相同组织中,以及同一组织不同发育阶段,糖胺聚糖结构都小相同,尤其在病变组织中,糖胺聚糖的含鬣和结构与常组织也存在较大差异肾脏是动物的重要器官,其糖胺聚糖的结构和含量在肾脏病变过程中发生显著变化—。因此,对肾脏糖胺聚糖的含量、种类及其结构进行系统研究具有十分重要的意义。本文以大鼠肾脏为研究对象,采烂附夥ê蜕法从中提取纯化糖胺聚糖【酆显擞玫缬竞透咝б合嗌谱紫外检测法对其含鼍、种类及二糖组成进行分析,为动物组织中微量糖胺聚糖的种类和细微结构研究提供参考。试剂与仪器实验动物;~周龄清洁级健康雄性大鼠只遛~,青岛市药检所实验动物中心提供;透明质酸,⒘蛩崛砉撬,⒘蛩崞し羲珼、硫酸乙酰肝素琀,肝素,⒗吕擅拦鶶公司;胰蛋白酶,美国荆荒瓜蛋白酶,美国荆蝗砉撬乩嗖槐ズ投潜曜品:△鱑,;硫酸乙酰肝素类不饱和二糖标准品:狝珹狧珹,△—蛞籋猄笠籋珹珹狝鱑狦Ⅳ一,△—Ⅳ鱑狦—珹捎⒐鶬司;软骨素酶,肝素酶—,肝索酶Ⅲ,均为美国荆字×司。,美国荆籇和海鸬銹荆淮姿嵯维素薄膜×本┝还荆黄渌约辆9治纯。型电泳槽,都友鳎本┝公司;型电泳仪,美国荆籘橹琋,—中国海洋大学医药学院山东省糖科学与糖工程重点实验室,山东青岛鱑珹珹,收稿期:—P薅┤掌冢基金项目:国家海洋计划钊涂萍疾抗屎献飨钅手作者简介:王皓,年生,中国海洋大学医药学院研究生:甤ㄑ读O等:蘣.
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腟脱剐阅懿睢⒘魉俾蚨治鍪奔涑ぃ疚牟司;町凝胶采集系统及峁胩致以葡萄糖醛酸为标准,参照文献,采用硫酸咔唑法第光谱学与光谱分析匀浆机,德国荆籈兔副暌牵鹿鶥软件,美国荆籄型岛效液相色谱仪浔觳馄,美阐尽大鼠肾脏糖胺聚糖的提取及纯化将大鼠处死后,取出肾脏剪碎、匀浆,依次加入倍体积丙酮和氯仿/甲醇:室温搅拌@胄ǔ恋砑跹筬:燥。脱脂干粉在缓冲液.,含胰蛋白酶和%甲苯℃·珻·。大鼠肾脏糖胺聚糖醋酸纤维素薄膜电泳分析将纯化的糖胺聚糖以及,,唬珻缺曜计贩别配成·.芤骸4姿嵯宋乇∧