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十二烷基苯磺酸钠共振散射光谱法测定木瓜蛋白酶活力黄国霞瘟’弘,梁爱惠艘党在,和牟个瑞利散射峰。在选定条件下,木瓜蛋白酶可水解酪蛋白引言1IB540()min(AA),十二烷基苯磺酸钠与酪蛋白形成缔合物微粒,,加嵝;可中止酶催化反应并与未反应的酪蛋白底物结合形成缔合物微粒。随着浓度的增11rIlPapainO04848好的线性关系。其线性回归方程为△岛鹤..,相关系数分别为UsPmL关键词木瓜蛋白酶;酪蛋白;十二烷基苯磺酸钠;共振散射光谱法木瓜蛋白酶是从未成熟的番木瓜中提取的巯基类蛋白酶,有很强的分解蛋白质的能力,在医药及医疗、食[1]法和紫外分光光度法等。。共振散射光谱法具有简便灵敏等特点’,已用于痕量无机和有机分析,但未见有通过测定底物剩余量的散射信号来测定木瓜蛋白酶活力的报道。本实验以酪蛋白为底物,以终止反应并与剩余底物相互(Rss)()TU_1901光光度计本┢瘴鐾ㄓ靡瞧饔邢拊鹑喂。木瓜蛋自酶液:准确称取竟系鞍酌ǎ虾;C郎锕こ坦,用缓冲液溶解,定mL10nlL-1释至所需浓度;IIlin甃柠檬酸溶液调节值至,同时迅速搅100n101L-1(SDBS)2oL-179fnL()TA-2Na2H20),加入畂白,置℃水浴锅中预热木瓜蛋白酶,用缓冲液稀释至,摇匀并开始计时,放后取出,加入畂470r!:褪约量瞻综蹋扑恪鱆一厶,R籐值。Papaincaseinpapain-SDBSe-******@275月光谱学与光谱分析May200715410042541004470儿范围内与△琽。呈现良9o02006576A文章编号:.—一品工业、纺织和皮革业、饲料、日用化妆品工业等方面有广定木瓜蛋白酶活力的新方法。仪器与试剂容至HmL_11og()o05Na2HP04,置沸水浴中加热nlL(),加100nlL()蒸馏水。实验方法在·酪蛋min60回℃水浴锅中,,用二次蒸馏水定容至畂,摇匀,放置共振散射光谱(0575042)作者简介:黄国霞,女,年生,广西师范大学环境与资源学院研究生*琋,—rn01L^1uSPrIlL-1200603-2820060628o05畂×甇×
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甚考察了浓度对体系的影响。当泌浓度为畂×薹。。ResIlltstheic薹№m瞿膎∞辩珂:研嘲嘶阻哆п秎5205470rn01LSD嘲愀SDceigt×一静稬光谱学与光谱分析paicaseinsDBs后,其散射信号显著增强。这是由于剩余底物即酪蛋白与作用形成了缔合物微粒。该微粒在,鹟考察了缓冲液值对体系的影响。当缓冲液的值为时,体系的△琽。值最大,为实验选用值。酶反应温度对体系的影响实验结果表明,当温度为℃时,体系的J5560rIlinLo以后增大的幅度比较小,本实验选择酶反应。木瓜蛋白酶是以巯基为活性基团的酶,这类[1]I活力,因此盐酸半胱氨酸是木瓜蛋白酶的良好激活剂。随ILomoL_1该酶促反应的终止剂又是酪蛋白的共振散射光谱测量试剂。甃~,体系的△琽。值最大。本方法选择的稬~。随着酪蛋白浓度的增加,体系的oo616有良好的线性关系。本方法选择的酪蛋白浓度为h15厶。值。共存物质的影响按照实验方法,考察了共存物质对体系共振散射测定的USPmL_1士ブ谑保瘛的组氨酸、甘氨酸、酪氨酸、CHA