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鞟耹:嬲删第卷搿背(I)栾尼娜饨跣’斡衩駂,吴111ysis引言25()1885(光籽与Speral謓 4摘要在生理值条件下,研究了芦丁与牛血清白蛋白和人血清白蛋白之间的结合作用。通过荧光法确定了芦丁与血清白蛋白的荧光猝灭机制,根据热力学方程讨论了两者间的主要作用力类型。芦丁对血清白蛋白的荧光猝灭机制为静态猝灭。确定了不同温度下该结合反应的结合常数和结合位点数,并根据热力学VanWaals够被血清白蛋白存储和转运,且结合时对蛋白质构象无影响。l06143A1000-0593(2008)04085604黄酮类化合物广泛存在于中药和植物中,是具有广泛药理活性的天然化合物Bǘ’,一四羟基黄酮一卉肯闾擒眨置肯丬铡⒆祥纹ぼ眨情纹に氐一。芸(1)P槐花有多种医药保健功能,如《日华子木草》中说槐花“治五痔、心疼、眼疾,,’。芦丁是临床上广泛使用的具有高效抗炎作用的药物,具有维持血管抵抗力,降低其通透性,减少脆性等作用,其在临床上主要用于防治脑溢血,高血压,视网膜出血和治疗慢性气管炎等疾病。血清白蛋白是血浆中最为丰富的蛋白质,不仅对维持渗透压起重要作用,而且能与进入血液中的大部分内源性和外源性物质如药物等进行可逆的结合从而起到在体内转运的作用。药物与白蛋白的亲和力大小也影响到药物在体内的分布、清理以及通过改变血液或组织中游离药物浓度来影响药效。因此,研究药物与血清白蛋白的结合作用对理解药物的作用机制具有重要意义阻引。关于研究芦丁与血清白蛋白作Eg]础上,进一步用热力学法研究芦丁与血清白蛋白的作用机制,得出了芦丁与血清白蛋白的结合常数、结合位点数和结合过程的基本热力学参数,为芦丁在体内的储存、运输、作用机理及临床试验提供有用的信息。仪器和试剂ü夥止夤舛燃美国,岛津公司QG灏椎鞍为国药集团化学试剂有限(HSA)司产品,芦丁猻公司产品,用无水甲醇配成toolL-110缓冲溶液,738(015tooLLNaCI)纯。荧光光谱测定在一系列mLBsA(HsA)pHTriS-HClk=280处扫描荧光光谱及在芦丁存在下的(0710ZAl08)12014010mmoLL-1畉珹。收稿日期:.修订日期:作者简介:栾尼娜,女,年生,西北师范大学化学化工学院讲师*e-mailpeterxjp@×738zuu
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§。.。2嘶~,谝籫,.,蛋白质分子中因含有三种芳香族氨基酸——色氨酸、酪琸4光谱学与光谱分析荧光光谱。荧光光谱荧光发射光谱及荧光猝灭机制氨酸和苯丙氨酸而产生内源性荧光。当某些小分子如药物与蛋白质结合后,会导致其荧光强度下降,这种现象称为荧光2BSA(HSA)体系的荧光强度逐渐降低,表明芦丁与之间发生BSA(HSA)BSA(HSA)(5mL)(100)荧光猝灭过程通常可以分为动态猝灭作用和静态猝灭作[11Stern-Volmel-FoF=1+KqoEQ3=1+Ksv[Q]F0F的荧光强度;NKǚ肿逾鸸痰乃俾食J为没有猝KsvStern-Volmer灭常数,是双分子猝灭速率常数与单分子衰变速率常数的比[Q]静态猝灭是猝灭剂和荧光物质分子在基态时生成不发光的配合物,从而导致荧光物质荧光强度降低的过程,此过程可用下式描述/式中,蚚与较嗤琄是基态配合物的形成常数。比较式褪可以看到,无论是静态猝灭还是动态猝灭,/与浯嬖谧畔咝喂叵见图。各类猝灭剂对生物大分子的最大扩散碰