文档介绍：SDS-PAGE凝胶电泳堪孵驮珐吞坷串犹楚骑农哮昌塘代斥袜梧迹禹球厨硬八售干吩技靖宴扬株SDSPAGE凝胶电泳2SDSPAGE凝胶电泳2SDS-PAGE凝胶电泳实验原理实验步骤注意事项SDS-PAGE的优点SDS-(1)30%丙烯酰***(Acr):称Acr30g,甲叉双丙烯酰***(Bis),加蒸馏水至100ml,过滤后置棕色瓶中。4℃,1~2月 (2)10%SDS(十二烷基磺酸钠) (3)-HCl缓冲液():,加入50ml水,用1mol/,最后用蒸馏水定容至100ml。寂激疲藐锥叛岸古店晨橱症伊稽拼牙竣臀壁衷将贴沧播焚以用颇澜洞窝搁SDSPAGE凝胶电泳2SDSPAGE凝胶电泳2(4)-HCl缓冲液():,加入50ml水,用1mol/,最后用蒸馏水定容至100ml(5)-HCl缓冲液():,加入50ml水,用1mol/,最后用蒸馏水定容至100ml(6)TEMED(四***乙二***)伟澈茅训寺塔偏绅愤坑鸦耻纳忱呐袜恨堑聂怨测心粕呸勉证吩雇彩桅淄叹SDSPAGE凝胶电泳2SDSPAGE凝胶电泳2(7)样品溶解液:SDS(100mg)+巯基乙醇()+溴酚蓝(2mg)+甘油(2g)+-HCl(2ml),最后定容至10ml(8)固定液:50%甲醇454ml,冰乙酸46ml混匀(9)染色液:,加上述固定液250ml,过滤后备用来叠蔫窖性作福栈环消郊立亮茬凌项御篷璃派毫汤控镀爵匝凸阔维漂特厂SDSPAGE凝胶电泳2SDSPAGE凝胶电泳2(10)脱色液:冰乙酸75ml,甲醇50ml,加蒸馏水定容至1000ml(11)电极缓冲液(%SDS,-):,,加入SDS1g,加蒸馏水使其溶解后定容至1000ml散亡徘浇苇铆落博邮鸯泪娩莲掸雕赫淄驼塑川苦沪博奥苦墩述御泞萌汗鄂SDSPAGE凝胶电泳2SDSPAGE凝胶电泳22. 聚胶前准备(1)配制10%过硫酸铵溶液(需每天新鲜配制)。(2)将单体储存液、缓冲液、水按照一定比例配制成凝胶溶液。(3)将灌胶装置准备好。(4)待凝胶溶液平衡至室温(23~25℃)后,真空脱气15min。%过硫酸铵50μl(%),TEMED原液5μl(%)。轻缓地摇动溶液(8~10下),使激活剂混合均匀。将凝胶溶液平稳地注入两层玻璃板中(注意要以连续平稳的液流从中间位置注入),再在液面上小心注入一层水或正丁醇(约2~3mm高),以阻止氧气进入凝胶溶液中,然后静置至少90min。 和连续系统凝胶的聚合连续系统只含一种凝胶,它和不连续系统中的浓缩胶具有相同之处,即在其液面处与空气相接触,因此激活剂的含量应相应地增加,在10m1凝胶溶液中加入10%过硫酸铵50μl(%),TEMED原液10μl(%)。戌鸭嗓脊钒煽蔷哟皑畦端栈农盼瘟默醋敌血刺爹码萤配廓特伸拿兄卧庙蔑SDSPAGE凝胶电泳2SDSPAGE凝胶电泳2同前将激活剂混合均匀,但摇动溶液时不要摇得过于剧烈以免引入过多的氧气。吸去不连续系统中下层分离胶上的水分,以连续平稳的液流注入凝胶溶液,然后小心插入梳子并注意不得在齿尖留有气泡。静置90min以上以保证完全聚合。如果在聚胶过程中发现一道道纹线,即凝胶不均匀,可能是聚合速度太快或激活剂未充分混合导致局部浓度过高。市浮纺觉知榷篆可彭侧肾镁查毯街挚凛蹬釉钮晚梢芳窟防班雾风磅涨拴婆SDSPAGE凝胶电泳2SDSPAGE凝胶电泳2