文档介绍：中山大学
硕士学位论文
同种异体NK细胞对骨髓瘤RPMI 8226细胞杀伤活性的体外研究
姓名:王秀菊
申请学位级别:硕士
专业:内科学
指导教师:尹松梅
20091115
同种异体细胞对骨髓瘤胞杀伤活性的体外研究细中文摘要中山大学孙逸仙纪念医院内科硕士研究生王秀菊导师尹松梅教授背景与目的琈是浆细胞恶性增生性疾病,约占血液恶性肿瘤的%。单药用于难治性效果欠佳,大多数单药化疗的有效率率低、缺乏嗪系墓┱撸浦蚕喙夭∷缆矢撸拗屏怂挠τ谩S捎谏鲜原因,到目前为止,仍被认为是不可治愈的疾病。因此,临床需要寻找治疗骨髓瘤的新方法。自体干细胞移植后输注抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受清除残留的肿瘤细胞,避免移植后疾病复发,延长生存期。在异基因造血干细胞移植中,同种异体反应性自然杀伤细胞有提高白血病治愈率的作用。最近研究显示,赴栽奈赴⒍裥院谏亓觥⑸尚待研究。细胞是遗传性免疫系统的主要效应细胞,对病原感染的或变异的细胞具多发性骨髓瘤非常低。联合化疗以及新的药物如沙利度胺和硼替佐米的使用仍达不到理想的疗效。自体造血干细胞移植虽可使部分患者病情缓解,但费用高,最终疾病仍要复发。异基因造血干细胞移植是治愈的根本手段,但因患者年龄较大、缓解体,一错配的异基因自然杀伤细胞猺,—魑P碌纳镏瘟品椒ǹ梢癌、肠癌和卵巢癌细胞也有杀伤作用。但是,赴怨撬枇鱿赴淖饔—细胞杀伤活性的体外研究
方法有自然细胞毒效应,细胞表面表达的受体与靶细胞表面的配体通过遗传模式识别发挥效应。细胞对靶细胞的杀伤活性与其细胞表面的受体和靶细胞表面结合,介导对细胞毒活性的抑制效应,,供者的同种成单位,表明细胞对白血病细胞和白血病克隆形成细胞具有杀伤效应。有研以对细胞杀伤活性高敏感性的细胞做对照来探讨:细胞对骨髓瘤细胞的杀伤活性;②其相关分子基础是什么;③能否通过调节,提高骨髓瘤牛物治疗方法,并其提供理论和实验依据。第一部分人骨髓瘤第二部分细胞对骨髓瘤细胞。以体外培养的和的配体密切相关。细胞表面的抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体,与靶细胞表面特定的甀类分子细胞对其杀伤活性。荖赴砻娴闹饕;罨允芴澹黄渑涮逦琈疊,篣、琋和肿瘤细胞表面的相应配体结合,介导细胞的杀伤效应。异基因造血干细胞移植中,当存在反应性细胞介导的抗白血病效应可以防止白血病复发。体外实验证实细胞能抑制慢性粒细胞白血病患者白血病赴纬闪O赴奘上赴湫究证实,配体错配的细胞可有效地杀伤原代的胃癌、肾癌、肠癌、卵巢癌肿瘤细胞,而无配体错配的细胞不具有杀伤活性。依据骨髓瘤的起源、病因、发病机理、生物学行为和对细胞功能的揭示,本研究以人骨髓瘤细胞和赴旌吓嘌7从μ逑担细胞对赴纳鄙嗣舾行浴1狙芯恐荚谘罢倚碌细胞的生物学特性观察光镜下细胞形态、生长特点,体外克隆形成率;流式细胞仪分析细胞周期分布、多药耐药蛋白及谋泶铩细胞的体外杀伤活性免疫磁珠法分离纯化】嫡叩腘赴逋釯培养魑Pв细胞为靶细胞,头欧ḿ觳獠煌效靶比时】嫡叩腘赴云涞纳鄙嘶钚裕范簂为最佳效靶比,进同种异体细胞对骨髓瘤细胞杀伤活性的体外研究中文摘要—畆
结果第三部分骨髓瘤细胞体外逃逸【细胞免疫杀伤机制的初步研究类分子细胞对和第四部分提高骨髓瘤细胞对细胞杀伤敏感性的变化,:盢赴訩蚏细胞体外克隆形成的影响。以樘崾约撂崛细胞和健康志愿者的细胞的籔.ú舛ń】抵驹刚逳赴鸎基因型。采用序列特异性引物扩增法分析细胞喾肿踊蛐,。。。细胞对赴鄙嗣舾行以热疗、三氧化二砷、硼替佐米处理的细胞为靶细胞,观察效靶比:盧处理后甈赴试残巍⑿∩ぃ赴禾灞对鍪奔湮。..ァO赴芷冢/%;和泶锫史直为..ァ%。染色体数目在之间。甿盅∠低炒炕玫降腘赴慷雀撸梢月闶笛樗琛甆赴訩赴纳鄙嘶钚栽谛О斜:、:时分别为细胞对细胞的杀伤活性在效靶比、:、:狈直鹞%。在同一效靶比,细胞对、%。两者之间的差异有显著统计学意义。说明细胞是对杀伤的低敏细胞。.ァ.:.ァ.%、.ィ..ァ%、同种异体细胞对骨髓瘤细胞杀伤活性的体外研究中文摘要
母髋涮澹琈加、琔、谋泶锫史直鹞差异均有统计学意义;。说明细胞对细胞的杀伤是通过与靶钍%相比差异无统计学意义;而阻断甀类分子后杀伤率为浓度三氧化二砷处理后三种处理方法均无改变甀类分