文档介绍：文献给敬爱的刘万顺教授和韩宝芹教授一⋯⋯⋯⋯马群
蚴㈣㈣萝§。塑:』:塑学位论文完成日期:指导教师签字:答辩委员会成员签字:
纠歹他⋯⋯躲玛砰学位论文作者签名:鸥辩签字日期:圳晁暝铝羧签字日期:为/口年岁月略日独创声明学位论文版权使用授权书签字日期:如声年厂月汐日本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,并同意以下事项:⒀S腥ūA舨⑾蚬矣泄夭棵呕蚧顾徒宦畚牡母从〖痛排蹋市论文被查阅和借阅。⒀?梢越宦畚牡娜ú炕虿糠帜谌荼嗳胗泄厥菘饨屑焖鳎梢采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊馀贪电子杂志社糜诔霭婧捅嗳隒吨泄J蹲试醋芸狻罚授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ导师签字:
壳聚糖基角膜内皮组织工程载体支架的制备及性能评价摘要目的:在我国,角膜病仅次于白内障是第二大致盲眼病,我国的单眼和双眼程技术的迅猛发展以及角膜细胞体外培养方法的建立,利用组织工程技术构建人角膜盲患者共有约蛉耍渲タ梢酝ü悄ひ浦彩质醺疵鳎捎诮悄供体来源短缺,目前我国每年能完成的角膜移植手术仅约例。随着组织工工角膜为治疗角膜盲提供了新的途径和方法,也成为当前研究的热点之一。壳聚糖是甲壳素脱乙酰后得到的聚阳离子生物多糖,安全、无毒、具有良好的组织相容性和生物降解性、降解产物可被人体吸收。近年来,壳聚糖在组织工程领域的研究也越来越受到人们的重视,以其为主要成分制备载体支架用于皮肤组织工程、骨骼组织工程、神经组织工程、血管组织工程等的实验研究已有报道;另外,以壳聚糖复合胶原、透明质酸或硫酸软骨素等制备的共混膜在构建人工角膜的研究中也得到应用。本研究以克服高脱乙酰度壳聚糖共混膜硬度高、植入体内降解速度慢等缺点为切入点,首次选择脱乙酰度%的水溶性壳聚糖为基本材料,采用共混的方法旨在制备出理化性质优异、组织相容性良好、适合角膜内皮细胞贴附生长的共混膜,为该种共混膜作为角膜内皮组织工程载体支架的可行性提供理论依据。方法:⒉握兆橹こ桃搅撇沸幸当曜级允笛槭抑票傅乃苄钥蔷厶乃帧⒒曳帧⒅亟鹗艉俊⒘6取⑾赴拘缘刃灾式胁舛ǎ、以水溶性壳聚糖为主体,按照体积比:、:、:的比例与明胶⒘蛩崛砉撬泄不熘票赋鋈楣不炷ぃ徊舛ü不炷さ含水量、通透性、透光率、细胞毒性等性质,评价兔角膜基质细胞在共混膜上贴附生长性能,筛选出一组共混膜作为进一步研究的对象;⒋;⒃谔外以共混膜为载体支架构建人工角膜内皮,考察兔角膜内皮细胞在共混膜上的贴附牢固程度及生长情况,研究共混膜与角膜内皮细胞的相容性,并制备曲率共混膜。结果:⑹笛槭抑票傅乃苄钥蔷厶欠献橹こ毯蜕镆接貌牧隙灾踩体内应用的材料的要求。细胞毒性试验显示水溶性壳聚糖对细胞完全没有
毒性,而且对其生长具有一定的促进作用,具有良好的细胞相容性。⑼ü三组共混膜性质的比对,发现体积比篏::、透光率优异、通透性良好、无细胞毒性、适合兔角膜基质细胞生长,可作为角膜载体支架材料。.瓹不炷け鹊ゴ靠蔷厶悄ぬ逋饨到馑俣瓤欤而且组织中炎症反应较轻,具有良好的生物降解性和组织相容性。其中,共混膜在大鼠背部皮下和股部肌肉内天左右基本被降解吸收;在兔眼前房内,观察期内无明显的炎症反应,植入后鲈鹿不炷せ颈晃铡、瓽—共混膜与角膜内皮细胞相容性良好,曲率共混膜也具有良好的透明性和一定机械强度,为后续动物移植实验奠定了基础。结论:实验室自制的脱乙酰度%的水溶性壳聚糖符合组织工程和生物医用材料对植入体内应用的材料的要求;以该种水溶性壳聚糖为主要材料,按体积比篏:簂:,与明胶、硫酸软骨素进行共混制备的膜片含水量合适、透光率优异、通透性良好、细胞毒性为丁⑹屎贤媒悄せ氏赴湍谄は赴长,在大鼠背部皮下、股部肌肉和兔眼前房内组织反应比较温和,炎症反应较轻,具有良好的组织相容性。总之,该共混膜具备作为组织工程角膜内皮载体支架的基本条件,通过对该共混膜的进一步研究,有望在构建组织工程活性人工角膜方面发挥积极作用。关键词:水溶性壳聚糖;载体支架;共混膜;组织相容性;组织工程角膜
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