文档介绍：北京协和医学院;中国医学科学院
博士学位论文
人脐带间充质干细胞移植治疗脑血管疾病的实验研究
姓名:廖文斌
申请学位级别:博士
专业:内科学
指导教师:韩忠朝
20090301
摘要背景:脑血管疾病是一类严重威胁人类健康的神经系统疾病,脑血管疾病包括脑缺血和脑出血两种亚型,因出血或缺血导致神经组织损伤从而引起神经功能的障脑血管疾病提供了可能。胚胎干细胞和成体干细胞都可以作为治疗神经系统疾病相对于胚胎干细胞和其它成体干细胞如神经干细胞等具有多方面的优点,因此近年来倍受研究者们的关注。实验证明,间充质干细胞对神经退行性疾病、神经免疫性疾病、神经系统损伤性疾病和脑血管疾病都有积极的治疗意义,尽管其潜在,环⑾挚梢宰魑狹的理想来源,,值得进我们去研究。目的:建立大鼠脑出血和脑缺血两种脑血管疾病模型,探讨人—浦捕源鼠脑血管的作用和作用机制,为人在神经科学领域的临床应用提供理论方法:利用酶消化法从足月妊娠剖宫产健康新生儿的脐带,通过贴壁法取得到原代培养的细胞,消化传代后,。线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,纹状体内定点注射细菌徒涸钢票部注射到脑缺血或脑出血模型中,在移植后的或每周进行一次和水迷宫两种神经功能的评价,在移植后天,行旧ǚ治瞿匀毖梗死面积的大小。脑出血的体积在天检测,并进行结晶紫/速兰蓝色显示其损和的水平。另外,在脑出血大鼠移植实验中,细胞移植后欤们还分析了损伤组织周围的炎症细胞浸润程度、神经元凋亡程度、以及活性氧簇突式鹗舻鞍酌呐ǘ取M保颐腔蛊兰哿薝体外的成血管能力和向神经诱导分化的情况。碍或缺失,至今临床上仍无有效的治疗办法。干细胞技术的发展为治疗甚至治愈的种子细胞。间充质干细胞琈粲诔商甯上赴的作用机制尚未明确。最近,脐带依据和实验基础。大鼠脑出血P汀S∈焙螅逋庥ü獗昙堑娜似甏鳰损伤局伤区域。移植后欤胿或染色脑组织切片,统计脑缺血/脑出血周围区域的血管密度,并且用相应的促血管增生因子抗体染色分析分析脑组织北京协和医学院中国医学科学院博士研究生学位论文
血模型中评分和水迷宫潜伏期明显短于哉兆椤R浦埠笃咛旖照组,在实验中,移植后的大鼠血管密度也明显高于对照组。此外,结论:人脐带梢杂行Т俳匀毖:湍猿鲅4笫蟮纳窬δ芑指矗淝痹诘关键词:脑血管疾病;结果:—谔逋饽芄环只晌Q9芟赴蜕窬赴浦驳侥匀毖:湍猿受—瘟频哪匀毖;蚰猿鲅4笫笏鹕酥芪サ难9苊芏让飨愿哂谒堑亩在校琔瘟颇芄挥行У囊种蒲字⑾赴慕螅档蚏和的浓度。机制和血管新生、抑制炎症相关。脐带;问充质干细胞;细胞移植;血管生成;抗炎北京协和医学院中国医学科学院博士研究生学位论文
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琒是个体、器官或组织的起始细胞,是一类具有自和多向分化潜能一新,可分化为内、中、外三个胚层的各种细胞、组织。经典的胚胎干细胞是从囊胚的内细胞团中分离出来的细胞,因此这种方法获取胚胎干细胞、建立胚胎干细胞系必须破坏胚囊,所以胚胎干细胞的分离、研究乃至用于临床治疗是否符合伦理道德的问题引起了全世界的广泛争论。随着干细胞技术的发展,现在已经证实可以将成体的终末分化细胞通过导入几个关键的因子使其再编程成为胚胎干细体导入基因,存在在编程效率低、成瘤性等问题,限制了它们在临床上的应用。成体干细胞是在胎儿、儿童和成人组织中存在的多能干细胞的统称,现在已经在多种组织器官发现了成体干细胞,除了我们熟知的造血干细胞外,还有神经干细胞、肝脏干细胞、心脏干细胞、间充质干细胞等等。一般认为,成体干细胞只能能力远超过传统观点局限的范围。例如神经干细胞可以分化为血液细胞,脐带血来源于发育早期中胚层,广泛存在于骨髓、骨膜、脂肪、羊水、真皮、牙、骨骼胞如骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等,还可以诱导分化为肝脏细胞、心肌细胞及支持造血的特性,另外旧硎且恢值兔庖咴葱缘南赴鸋,因此,目前成为干细胞研究领域的热点,被广泛应用于各系统疾病的治疗研究。脑血管病是指脑部动脉或支配脑的颈部动脉发生病变,从而引起颅内血液循环障碍,脑组织受损的一组疾病。脑血管病按其性质可分为两大类,缺血性和出血性脑血管病。脑血管疾病已经成为仅次于心血管疾病的第二大致死性疾病—獭E目Ⅱ青干细胞我更新的细胞。根据个体发育过程中出现的先后次序不同,分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞能够无限地自我更胞样的细胞,这种细胞被称为诱导性多能干细胞淙豢梢匀乒桌淼赖挛侍猓且蛭P枰=柚《驹分化为其组织器官的细胞类型,然而,最近几年的研究表明,这些干细胞的分化干细胞可以分化为神经细胞取<涑渲矢上赴琈肌、胎肺、胎肝、脐血、脐